過剰排卵処置に続く経腹壁エコーガイドで採取したブタ卵子に由来する受精卵の特徴

超排卵后经腹膜超声引导采集猪卵受精卵的特征

基本信息

批准号：
22H02519
负责人：
高須正規
金额：
$ 10.65万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02519/
关键词：
ブタ受精卵移植卵子成熟 OPU

项目摘要

岐阜県では2018年に発生した豚熱によって，10年以上かけて作成したブランド豚を失った。このとき，もしその受精卵を遠隔地で保存し，避難させられる技術があればブランド豚を失うことはなかった。この経験を経て申請者は新たなブタ受精卵の採取法に関する研究を開始し，2021年になってその採取法（OPU）の基礎を確立できた。本研究は，新規OPUを発展させ，ブタにおいても1）受精卵の保存（遺伝子資源の保存）ならびに2）受精卵移植の育種改良への活用を実用化することを目標としている。本年度，新規OPUで得られた卵子を用いて受精卵を作製し，これを借り腹に移植することで産子を獲得できることを確認した。まず新規OPUでマイクロミニピッグから卵子を採取し，体外受精・発生させた。この方法でおおよそ20-30個の卵子を採取できた。得られた卵子を体外受精・培養すると，卵割した受精卵の半数以上が胚盤胞になった。次に得られた胚盤胞を凍結保存した。これを解凍し，発情から4-6日の借り腹に移植したところ，移植後20日に超音波検査で妊娠を確認した。最終的に，移植した受精卵に由来する2頭のマイクロミニピッグ産子を獲得できた。今回，新規OPU-受精卵作製・凍結-移植で産子が得られた。しかし，未だ新規OPU-受精卵作製・凍結-移植に最適なプロトコールを確立できていない。このため，来年度以降，ブタにおける受精卵移植を実用可能なものとするために，新規OPU卵子の成熟，体外培養，受精卵の凍結・融解，移植に関する知見を重ねる予定である。

在岐阜县，由于2018年猪瘟的爆发，花了10多年时间打造的品牌猪肉消失了。此时，如果有技术能够将受精卵储存和疏散到偏远的地方，品牌猪就不会丢失。有了这次经验，申请人开始研究一种收集受精猪卵的新方法，并于2021年建立了该方法的基础（OPU）。本研究旨在开发一种新的OPU并将1）受精卵保存（遗传资源保存）和2）利用受精卵移植用于猪的育种改良商业化。今年，我们确认可以使用新OPU获得的卵子产生受精卵，并将其移植到借来的肚子里。首先，使用新型OPU从微型猪身上采集卵子，并在体外受精和发育。使用这种方法收集了大约 20-30 个鸡蛋。当获得的卵子进行体外受精和培养时，一半以上的卵裂受精卵成为囊胚。然后将所得囊胚冷冻保存。发情后4至6天将其解冻并移植到借来的腹部，移植后20天通过超声波检查确认怀孕。最终，我们通过移植的受精卵获得了两只微型猪后代。这次，一个新的 OPU 受精卵被创造、冷冻并移植，产生了一窝幼崽。然而，新 OPU 受精卵生产、冷冻和移植的最佳方案尚未确定。因此，从明年开始，我们计划积累新OPU卵的成熟、体外培养、受精卵冷冻/解冻和移植方面的知识，以使猪的受精卵移植实用化。