マウス胎児精巣におけるCyp26b1遺伝子の制御機構の解明

阐明小鼠胎儿睾丸Cyp26b1基因的调控机制

• 批准号: 23890051
• 负责人: 鹿島田 健一
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011-08-24 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23890051/
• 关键词: 性分化; 精巣; 生殖細胞; 減数分裂; レチノイン酸

1 : マウス胎児性腺におけるCyp26b1遺伝子発現調節機構に対するSF1,SOX9の関与とそのメカニズムの検討として以下の知見を得た。(1) : マウスSertoli細胞のモデルであるTM3細胞において、SF1,SOX9はCyp26b1遺伝子の発現を活性化させる(in vitroにおける証明)。(2)SOX9のコンディショナルノックアウトマウス、およびSf1欠損モデルマウスである、Cited2ノックアウトマウスにおいて、Cyp26b1遺伝子の発現が低下している(in vivoにおける証明)。2 : Cyp26b1遺伝子の卵巣特異的転写因子FOXL2による発現調節効果について以下の知見を得た。(1)マウスSertoli細胞のモデルであるTM3細胞において、FOXL2はSF1およびSOX9によるCyp26b1発現効果を抑制する(in vitroにおけるFOXL2の抑制効果の証明)。(2)FOXL2ノックアウトマウスの卵巣においては、野生型に比べ、Cyp26b1遺伝子の発現が約20倍上昇している(in vivoにおけるFOXL2のCyp26b1遺伝子抑制効果を指示する所見)。以上よりマウス胎児性腺においてはCyp26b1はSOX9/SF1とFOXL2の拮抗的な機構による転写制御を受けていることが判明した。一方MLPA法によるCyp26b1遺伝子の性腺特異的エンハンサー同定については、共同研究者である、A.Sinclair教授の研究室でSf1-GFPマウスを用いて行う予定であったが、マウスのコロニーの調整に時間がかかったこと、また初回のアレイが原因不明ではあるが、有意なデータが得られなかったことなどがあり、現在2回目のアレイが進行中であり、アレイに基づいた解析を行うまでに至っていない。この2回目のアレイは近日中に送られてくる予定であり、アレイデータが得られ次第速やかに解析を行う予定である。

1：以下发现是作为研究SF1和SOX9参与CYP26B1基因表达在小鼠胎儿性腺中的机理的研究。 （1）：在TM3细胞中，小鼠Sertoli细胞的模型SF1和SOX9激活了CYP26B1基因的表达（体外证明）。 （2）在有条件的Sox9和Custed 2基因敲除小鼠（SF1缺陷型模型小鼠（体内证明）中，CYP26B1基因的表达降低。 2：通过卵巢特异性转录因子FOXL2获得了以下发现有关CYP26B1基因的表达调节作用的结果。 （1）在TM3细胞（小鼠Sertoli细胞的模型）中，FOXL2抑制了SF1和SOX9的CYP26B1表达效应（FOXL2体外的抑制作用的证明）。 （2）在FOXL2基因敲除小鼠的卵巢中，CYP26B1基因的表达比野生型高约20倍（检测表明cyp26b1基因在体内抑制了foxl2的效果）。从上面可以发现，CYP26B1通过SOX9/SF1和FOXL2在胚胎性腺中的拮抗机制进行转录调节。另一方面，计划使用MLPA方法鉴定CYP26B1基因的性腺特异性增强剂，以在合作者A. Sinclair教授的实验室中使用SF1-GFP小鼠进行，但仍花时间调整小鼠的菌落，尽管最初的阵列的原因尚无明显的数据，但尚无大量数据。第二个数组目前正在进行中，并且尚未达到基于数组的分析。预计将很快发送第二个数组，并在获得数组数据后立即进行分析。

项目成果

Antagonistic regulation of Cyp26b1 by transcription factors SOX9/SF1 and FOXL2 during gonadal development in mice

• DOI: 10.1096/fj.11-184333
• 发表时间: 2011-10-01
• 期刊: FASEB JOURNAL
• 影响因子: 4.8
• 作者: Kashimada, Kenichi;Svingen, Terje;Koopman, Peter
• 通讯作者: Koopman, Peter