フェロトーシスを標的としたポドサイト障害に対する新規治療戦略の確立

建立针对铁死亡的足细胞疾病新治疗策略

• 批准号: 22K20846
• 负责人: 井出 真太郎
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20846/
• 关键词: フェロトーシス; ポドサイト; 慢性腎臓病; 糖尿病性腎症; 尿蛋白

申請者は、新規細胞死であるフェロトーシスを腎臓全体で誘導するマウスでは著明な尿蛋白を呈することに着目し、蛋白を尿に漏出しない役割を持つポドサイトの障害にフェロトーシスストレスが関与している可能性を考えた。本申請研究の目的は、正常及び障害ポドサイトにおけるフェロトーシスの役割を明らかし、ポドサイト傷害においてフェロトーシスが治療標的になり得るかを明らかにすることである。初年度ではそれぞれの研究計画について下記の成果が得られている。研究計画 1: 定常状態のポドサイトにおけるフェロトーシスの機能解析初年度では、ポドサイトにフェロトーシスを誘導することを目的に、フェロトーシスを抑制する遺伝子であるGpx4をポドサイト特異的に欠損するマウスを作成し、解析することを目的とした。現在、これらのマウスに対し、Gpx4欠損の誘導を行い、時系列ごとに表現形の解析を進めている。加えて、次年度では今マウスを用いて単一細胞シークエンス法を行う予定であるが、より多くのポドサイトの細胞集団を得ることが可能なプロトコルを確立した。研究計画 2: 糸球体傷害におけるポドサイトでのフェロトーシスの機能解析糸球体傷害モデルにおいてフェロトーシスが誘導されているかを確認するため、高血糖を誘導して４週、１２週の腎臓においてフェロトーシス評価を行なった。その結果、細胞死を示すTUNEL陽性細胞は少数であったが、過酸化脂質の一部蓄積を認め実際のポドサイト障害モデルにおいてフェロトーシスストレスが誘導されていることが明らかになった。現在高血糖モデル以外の糸球体障害モデルとして、高血糖・高脂肪食負荷モデルについても同様の検討を行っている。

申请人的重点是诱导铁铁作用的小鼠（一种新的细胞死亡）在整个肾脏中表现出明显的尿蛋白，并考虑到可能参与足细胞疾病的甲状腺毒应激，这可能不让蛋白质渗入尿液中。这项申请研究的目的是阐明铁毒性在正常和受损的足岩中的作用，并确定铁铁作用是否可以成为Podosite损伤中的治疗靶标。在第一年，为每个研究计划获得了以下结果：研究设计1：第一年的稳态足体螺栓凋亡的功能分析，目的是诱导Podosites的铁腐烂，并创建和分析小鼠，并在GPX4中特别缺乏Podosites，该基因抑制了Ferropttosis的GPX4。当前，这些小鼠诱导了GPX4缺乏症，并且在每个时间序列中进行表型分析。此外，现在将在明年使用小鼠进行单个细胞测序方法，但是已经建立了一项方案，该方案允许获取较大的足细胞细胞群。研究设计2：肾小球损伤中足细胞的铁凋亡的功能分析，以确认是否在肾小球损伤模型中诱导了铁胞菌病，在肾脏在4和12周的高血糖中进行了铁质剂评估。结果表明，尽管只有少数TUNEL阳性细胞表现出细胞死亡，但在足细胞疾病的实际模型中诱导了铁毒性应激，并有一定的脂质过氧化脂质。当前，除高血糖模型以外，还针对高血糖和高脂饮食量模型进行了类似的研究。

项目成果

糖尿病性腎臓病において選択的PPARαモジュレーターは尿細管障害を軽減させる

选择性 PPARα 调节剂可减少糖尿病肾病的肾小管损伤

• 发表时间: 2023
• 作者: 井出真太郎;前澤善朗;井出佳奈;塚越彩乃;寺本直弥;横手幸太郎
• 通讯作者: 横手幸太郎