Functional analyses of sugar codes of exosomes and biomedical applications

外泌体糖代码的功能分析及生物医学应用

基本信息

批准号：
22H00585
负责人：
秋吉一成
金额：
$ 26.62万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本研究では、これまでに十分解明されていないエクソソームの糖鎖コード機能に関する研究を行い、エクソソームの糖鎖科学を基盤とした、分離、計測、解析技術などの基礎研究からそのバイオ医療応用研究を推進する。１）新規レクチンマイクロアレイによるエクソソームの糖鎖解析　本年度着手したC型レクチンなどヒトレクチン受容体を用いた新規ヒトレクチン受容体マイクロアレイを調製するために、レクチンのプラスミドを調製して、発現、単離精製し、５０種類程のレクチンのアレイスポット化にも成功した。２）新規糖鎖基盤分離システムの開発とエクソソーム機能解析　植物レクチンであるシアル酸認識レクチンを磁気ビーズに固定化して、エクソソームの分離精製し、植物レクチンマイクロアレイ解析を行なって、エクソソーム表層糖鎖を基盤とするサブクラス分離が可能であることを明らかにした。３）エクソソーム単粒子の糖鎖プロファイリング技術の開発　イメージングサイトメトリーを用いて、蛍光標識したエクソソームと蛍光標識レクチンとの解析を行い、エクソソームの単粒子糖鎖解析を行えることが分かった。間葉系幹細胞由来エクソソームにおいて、９０％以上のエクソソーム表層にはシアル酸が存在していることが明らかになった。種々のレクチンでの検討を進めた。

在本研究中，我们将对迄今为止尚未完全阐明的外泌体的聚糖编码功能进行研究，并将开展分离、测量和分析技术的基础研究，以及基于外泌体聚糖科学的生物医学应用研究。推动1) 使用新型凝集素微阵列进行外泌体糖链分析为了利用今年开始的C型凝集素等人类凝集素受体制备新型人类凝集素受体微阵列，我们制备了凝集素质粒，表达并分离，并成功制作了约50种凝集素的阵列点。 2）新型基于聚糖的分离系统的开发和外泌体功能分析：我们将识别唾液酸的植物凝集素固定在磁珠上，分离和纯化外泌体，并进行植物凝集素微阵列分析以分析表面聚糖基外泌体的亚类分离是可能的。 3）单外泌体颗粒糖链分析技术的开发利用成像细胞术，分析了荧光标记的外泌体和荧光标记的凝集素，发现分析外泌体的单颗粒糖链是可能的。研究表明，90%以上的间充质干细胞来源的外泌体的表面层都存在唾液酸。我们继续使用各种凝集素进行研究。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

エクソソーム工学と医療応用

外泌体工程和医学应用

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Noe Kikuchi;Lanlan Bai;Hiroaki Sano;Takahiro Eitsuka;Kiyotaka Nakagawa;Hitoshi Tomita;Eriko Sugano;Tohru Kiyono;Tomokazu Fukuda;秋吉一成
通讯作者：
秋吉一成

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