新規幹細胞源として期待される神経堤由来幹細胞の歯根膜からの分離解析

牙周膜神经嵴干细胞的分离与分析，有望成为干细胞的新来源

• 批准号: 21890081
• 负责人: 加来 賢
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21890081/
• 关键词: 歯根膜; 幹細胞; 神経堤幹細胞

歯根膜は発生段階において間葉のみならず神経堤にも由来しているが、これまでに歯根膜において同定された幹細胞は間葉に由来するものばかりであった。そこで申請者らは神経堤由来細胞を追跡可能な遺伝子改変マウスを用いて免疫組織学的に検索を行ったところ、神経堤由来幹細胞の存在を強く示唆する知見を得る事に成功し、この研究では神経堤由来幹細胞を分離抽出し、その分化能および力学的刺激への応答能を解析し、歯周組織再建に向けた新たな幹細胞源を明らかにすることを目的とした。我々は組織標本上にて歯根膜細胞中のさらなる幹細胞マーカーの発現を検索し、HNK-1/CD57,SOX10の発現が、神経堤由来細胞において高頻度で見られることを明らかにした。現在マウスおよびヒト歯根膜由来細胞を用い、神経堤幹細胞について幹細胞能を維持した状態での培養の至適条件を検索中である。当初予定していた血清を含まない培養条件では生細胞が得られなかったため、神経幹細胞培養に用いられる添加物を使用した条件を検討中であるている。これまでのところ異なる培養条件において異なる形態を示す細胞群の分離に成功しており、さらなる条件の絞り込みをすすめている。また、使用を予定した遺伝子改変マウスはミシガン大学からの移管が大幅に遅れたため、東京医科歯科大学より移管する事とした。現在動物実験施設に於いて手続き中である。

牙周膜不仅来源于间充质，在发育阶段也来源于神经嵴，但迄今为止在牙周膜中发现的所有干细胞均来源于间充质。因此，申请人使用可追踪神经嵴来源细胞的基因改造小鼠进行了免疫组织学研究，并成功获得了强烈提示神经嵴来源干细胞存在的结果。本研究的目的是分离和提取神经嵴来源干细胞。牙槽嵴来源的干细胞，分析其分化能力和对机械刺激的反应能力，并确定用于牙周组织重建的新的干细胞来源。我们搜索了组织标本上牙周膜细胞中其他干细胞标志物的表达，发现在神经嵴衍生细胞中经常观察到 HNK-1/CD57 和 SOX10 的表达。我们目前正在寻找培养神经嵴干细胞的最佳条件，同时使用小鼠和人类牙周膜来源的细胞维持其干细胞潜力。由于在最初计划的无血清培养条件下无法获得活细胞，因此我们目前正在考虑使用神经干细胞培养中使用的添加剂的条件。到目前为止，他们已经成功分离出在不同培养条件下表现出不同形态的细胞群，并正在努力进一步缩小条件范围。此外，由于原计划从密歇根大学转移的转基因小鼠出现了严重延误，我们决定从东京医科齿科大学转移它们。该程序目前正在动物测试设施中进行。

项目成果

Effect of cyclic mechanical loading on osteoclast recruitment in periodontal tissue.

• DOI: 10.1111/j.1600-0765.2008.01193.x
• 发表时间: 2010-02
• 期刊: Journal of periodontal research
• 影响因子: 3.5
• 作者: K. Nozaki;M. Kaku;Y. Yamashita;M. Yamauchi;H. Miura

成体歯根膜における神経堤由来幹細胞の検索

在成人牙周膜中寻找神经嵴衍生干细胞

• 发表时间: 2009
• 作者: Nozaki K;Kaku M;Yamashita Y;Yamauchi M;Miura H.;Masaru Kaku
• 通讯作者: Masaru Kaku

WCOI year book 2009

2009年WCOI年鉴

• 发表时间: 2009
• 作者: Kaku M;Uoshima K
• 通讯作者: Uoshima K