EZH2在小鼠iPS细胞向PGC分化中的作用研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81100471
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    22.0万
  • 负责人：
    秦洁
  • 依托单位：
    北京大学
  • 学科分类：
    H0414.早期胚胎发育
  • 结题年份：
    2014
  • 批准年份：
    2011
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2012-01-01 至2014-12-31

项目摘要

组蛋白赖氨酸甲基转移酶EZH2是参与干细胞自我更新、分化和细胞增殖的上游调控因子，可通过关闭/打开基因指导干细胞分化。本项目前期研究结果表明EZH2可能通过作用stra8基因调控miPS细胞分化。本项目拟：（1）采用视黄酸(atRA)诱导miPS细胞向原始生殖细胞 (PGC) 分化，通过超表达/siRNA干扰表达、嵌合体小鼠制备等技术研究EZH2影响 PGC增殖分化及体内发育分布的作用机制；（2）采用染色质免疫共沉淀技术确定EZH2与其靶基因结合特性及表达调控；通过甲基化敏感性高分辨溶解等方法检测EZH2及生殖细胞分化特征基因的甲基化水平，分析这些基因的活化时序以及差异表达的内在联系。本项目将深入解析EZH2在miPS分化中的上游表观遗传调控机制，预期研究结果对于阐明配子细胞发生的分子机理具有重要的学术意义，也将为干细胞治疗研究领域提供有价值的原始资料和科学依据。

结项摘要

组蛋白赖氨酸甲基转移酶EZH2 是表观遗传调控因子PcG 蛋白的核心成分。本项目前期研究结果表明EZH2可能通过作用减数分裂前生殖细胞特异基因Stra8（Stimulated by retinoic acid gene 8）调控小鼠诱导多能干细胞(mouse induced pluripotent stem cells, miPS)分化。因此，我们进一步对EZH2在miPS分化中的调控机制进行了初步研究，研究结果显示：⑴ 将小鼠iPS细胞系miPS(IP14D-1)通过悬浮培养分化形成拟胚体(iEBs)作为向生殖细胞分化的启动步骤，1µmol/L全反式维甲酸(atRA)持续诱导iEBs 2、4和7d。与不添加RA 培养的iEBs相比，处理后iEBs的形态无明显变化。⑵ RT-PCR检测IP14D-1细胞及不同时间iEBs的生殖细胞分化相关基因表达，发现IP14D-1及相应的iEB均表达EZH2和Stra8。⑶ 根据RT-PCR结果，采用免疫荧光方法检测EZH2和Stra8在未分化IP14D-1及RA诱导的不同时间iEBs中的表达情况。发现stra8阳性信号均定位在胞浆中，而EZH2定位于胞膜上，Stra8阳性信号相对强于EZH2，与RT-PCR结果相一致。⑷ 采用实时荧光定量RT-PCR（Real-time RT- PCR）检测EBs 中EZH2和Stra8的表达水平，结果表明，在细胞分化过程中伴随EZH2表达下降，PGC分化的特征性基因Stra8表达上调。⑸ 进一步采用Western blot检测EZH2-siRNA对Stra8蛋白表达的影响：将分别EZH2-siRNA转染RA诱导后2d和4d的iEBs， EZH2-siRNA转染iEBs后, Stra8的蛋白表达水平显著升高。 ⑹ 初步探讨iEB中EZH2和Stra8之间的相互作用：以4d的iEBs为研究对象，裂解后获得来自iEBs的总蛋白，采用兔抗单克隆抗体EZH2、兔抗多克隆抗体Stra8和正常对照兔IgG，然后进行免疫共沉淀，确定EZH2和Stra8是否相互作用。结果显示在4d的iEBs中，EZH2和Stra8发生相互作用。结论：本研究初步探明了EZH2及其下游靶基因Stra8在atRA(全反式视黄酸)诱导的小鼠iPS细胞系分化过程中的表达及定位，并证明了EZH2和Stra8存在相互作用，研究成果将可能为进

项目成果

期刊论文数量（10）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
span style=font-family:Times New Roman;color:black;font-size:12pt;miRNA-138/spanspan style=font-family:宋体;color:black;font-size:12pt;与/spanspan style=font-family:Times New
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    临床泌尿外科杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    秦洁;李晓庆;赵春娟;漆正宇;郭新;龙霞;余振东;桂耀庭
  • 通讯作者：
    桂耀庭
LIN28A和LAMP1在膀胱癌细胞系中的表达及意义
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2014
  • 期刊：
    临床泌尿外科
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张艳敏;秦洁;漆正宇;龙霞;郭新
  • 通讯作者：
    郭新
span style=font-family:宋体;color:black;font-size:12pt;中药厚朴中酚类小分子化合物抗鼻咽癌的机制研究/span
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    中草药
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    秦洁;李晓庆;赵春娟;漆正宇;陈静;余振东;聂国辉
  • 通讯作者：
    聂国辉
PcG蛋白EZH2在全反式维甲酸诱导的小鼠iPS细胞系分化过程中的作用
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    基础医学与临床
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    张艳敏;漆正宇;郭新;崔光辉;秦洁
  • 通讯作者：
    秦洁
Effect of all-trans-retinoic acid on the expression of primordial germ cell differentiation-associated genes in mESC-derived EBs
全反式视黄酸对 mESC 来源的 EB 中原始生殖细胞分化相关基因表达的影响
  • DOI：
    10.1042/cbi20110423
  • 发表时间：
    2012-05-01
  • 期刊：
    CELL BIOLOGY INTERNATIONAL
  • 影响因子：
    3.9
  • 作者：
    Guo, Xin;Qi, Zheng-Yu;Cai, Zhi-Ming
  • 通讯作者：
    Cai, Zhi-Ming

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--"}}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--" }}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--"}}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

其他文献

基于耦合辅助信息的矩阵分解和靶向GPCRs的配体活性预测方法
  • DOI：
    10.15983/j.cnki.jsnu.2021.01.001
  • 发表时间：
    2021
  • 期刊：
    陕西师范大学学报. 自然科学版
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    吴建盛;兰闯闯;秦洁;朱燕翔;胡海峰
  • 通讯作者：
    胡海峰
微造型对滑动轴承摩擦学性能影响的研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    --
  • 期刊：
    四川大学学报( 工程科学版)
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李以农;秦洁;孟凡明;杨涛
  • 通讯作者：
    杨涛
氮素添加对贝加尔针茅草原土壤团聚体微生物群落的影响
  • DOI：
    10.5846/stxb201911192503
  • 发表时间：
    2021
  • 期刊：
    生态学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    李明;赵建宁;秦洁;祁小旭;红雨;杨殿林;洪杰
  • 通讯作者：
    洪杰
氮沉降对贝加尔针茅草原土壤真菌群落结构的影响
  • DOI：
    10.11733/j.issn.1007-0435.2019.01.009
  • 发表时间：
    2019
  • 期刊：
    草地学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    刘红梅;张海芳;秦洁;杨殿林
  • 通讯作者：
    杨殿林
氮添加对贝加尔针茅草原土壤活性有机碳和碳库管理指数的影响
  • DOI：
    10.11686/cyxb2019477
  • 发表时间：
    2020
  • 期刊：
    草业学报
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    刘红梅;张海芳;赵建宁;王慧;秦洁;杨殿林;张乃芹
  • 通讯作者：
    张乃芹

其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI：
    {{ item.doi || "--" }}
  • 发表时间：
    {{ item.publish_year || "--"}}
  • 期刊：
    {{ item.journal_name }}
  • 影响因子：
    {{ item.factor || "--" }}
  • 作者：
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者：
    {{ item.author }}
empty
内容获取失败，请点击重试
重试联系客服
title开始分析
查看分析示例
此项目为已结题，我已根据课题信息分析并撰写以下内容，帮您拓宽课题思路：

AI项目思路

AI技术路线图

相似国自然基金

{{ item.name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 批准年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}

相似海外基金

{{ item.name }}
{{ item.translate_name }}
  • 批准号：
    {{ item.ratify_no }}
  • 财政年份：
    {{ item.approval_year }}
  • 资助金额：
    {{ item.support_num }}
  • 项目类别：
    {{ item.project_type }}
{{ showInfoDetail.title }}

作者：{{ showInfoDetail.author }}

知道了

AI项目解读示例

课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
关闭
close
客服二维码