アダプター欠損マウスを用いた薬物の消化管吸収機構と疾患発症のインビボ解析

使用适配器缺陷小鼠体内分析药物胃肠道吸收机制和疾病发生

基本信息

批准号：
21890085
负责人：
杉浦智子
金额：
$ 1.7万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、薬物の消化管吸収に働くin vivoで重要な新規輸送機構の解明を目的として、in vitroおよびin vivo実験でトランスポーターの機能・発現調節因子であることを示唆してきたアダプタータンパク質PDZK1に着目した。これまでに申請者はpdzk1遺伝子欠損マウス(pdzk1^<-/->)を用いた検討により、PDZK1は小腸刷子縁膜上に発現する複数のトランスポーター(PEPT1,OCTN2)の発現およびトランスポーター基質となる薬物の消化管吸収を制御することをin vivoで明らかとした。本年度はさらに有機アニオントランスポーターOATP1Aについて更に検討した。OATP1Aも小腸刷子緑膜でPDZK1と相互作用することを免疫沈降法により明らかとした。また、pdzk1^<-/->の小腸において、OATP1A1の小腸刷子縁膜での発現は減少し、OATP1A1の典型的基質であるestron-3-sulfate(E3S)の小腸組織への取り込みが減少した。OATP1A1は小腸だけでなく肝臓の類洞膜側にも発現しており、PDZK1によって制御される。したがって、E3Sを十二指腸投与後の循環血漿中濃度推移は野生型マウス(wild-type)とpdzk1^<-/->間に差は見られなかった。しかし、E3S十二指腸投与後の門脈血中の濃度はwild-typeに比べ、pdzk1^<-/->で有意に低く、循環血-門脈血濃度の差から求められるE3Sの消化管吸収率もpdzk1^<-/->で顕著に低かった。よって、PDZK1はOATP1A1の小腸での発現およびその機能を制御することが明らかとなった。近年、市販されている医薬品の中でOATPsによって認識される薬物が報告されていることから、pdzk1^<-/->を用いることで、薬物の消化管吸収メカニズムの解明につながることが示唆された。以上、本研究は順調に進行している。

今年，我们专注于衔接蛋白PDZK1，这表明它是转运蛋白功能和体外和体内实验表达的调节剂，其目的是阐明新型的传输机制，这些机制对于吸收胃肠道吸收药物的体内很重要。到目前为止，申请人已经使用PDZK1基因缺陷小鼠（PDZK1^< - / - >）进行了研究，并在体内揭示了PDZK1调节在小肠道灌木膜和胃肠道吸收量的小肠道灌木丛中表达的多个转运蛋白（PEPT1，OCTN2）的表达，该药物是termerters s servers sems severs sermers selporters serpors selports semports selporters sems selports selports sems sems sems sems selports sems sems selports sems selports。今年，我们进一步考虑了有机阴离子转运蛋白OATP1A。免疫沉淀显示OATP1A在小肠刷的绿色膜上也与PDZK1相互作用。此外，在PDZK1^< - / - >的小肠中，降低了小肠刷边框膜中OATP1A1的表达，并降低了OATP1A1的典型底物，摄入Estron-3-3S（E3S），降低了小肠组织的典型基质。 OATP1A1不仅在小肠中表达，而且在肝脏的正弦膜侧也表达，并且受PDZK1调节。因此，在十二指肠施用E3S后，野生型小鼠和PDZK1^< - / - >之间没有观察到差异。然而，PDZK1^< - / - >在施用E3S十二指肠后门静脉的浓度明显低于野生型中的浓度，并且由循环门静脉静脉浓度差异确定的E3S的胃肠道吸收率在PDZK1^< - / - >中也显着降低。因此，已经揭示了PDZK1调节小肠中OATP1A1的表达和功能。近年来，已有燕麦识别的药物在市售药物中据报道，这表明使用PDZK1^< - / - >可以导致阐明药物胃肠道吸收机制。这项研究正在稳步发展。