生殖機能を抑制する神経回路の解明

阐明抑制生殖功能的神经回路

• 批准号: 15H06154
• 负责人: 棟朝 亜理紗
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-08-28 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H06154/
• 关键词: KNDyニューロン; ダイノルフィン; κオピオイド受容体; 弓状核

性腺の維持、卵胞発達や精子形成に必須である性腺刺激ホルモン放出ホルモン（GnRH）パルス分泌制御は視床下部弓状核に存在するKNDyニューロンが担っている。しかし、KNDyニューロンが分泌する抑制性神経伝達物質であるダイノルフィンの標的細胞は不明である。それゆえ、本研究ではダイノルフィン受容体であるκオピオイド受容体（KOR）を発現する神経細胞の実態を明らかにすることを目的とした。平成27年度は、本研究で使用する予定であるKOR標識トランスジェニックラットが使用できるか標識特異性の検討とVenus陽性細胞の細胞特性の同定を行った。このトランスジェニックラットはKORプロモーター制御下で蛍光タンパク質Venus遺伝子が発現するように作成した。Venusの発現は大脳皮質、室傍核、背内側核で高く、弓状核、中脳後脳境界においても確認された。これらのVenus陽性細胞の細胞特性を同定するため、細胞マーカータンパク質に対する抗体を使用した免疫組織化学二重染色法を用いて解析した。初めにVenusと神経細胞マーカーNeuNとの免疫二重染色を行った。VenusとNeuNは共局在していることが明らかになり、Venusは神経細胞に発現していることが判明した。次に、Venusとキスペプチン（Kiss）の免疫二重染色を行った。その結果、VenusとKissは異なる細胞に局在していた。先行研究でKissニューロンにはKORが発現していないことが明らかになっている。これらのことから、Venus発現特異性の一端を確認できた。これに加えて、VenusとERαの免疫染色を行った結果、VenusとERαは共局在していないことが明らかになった。この結果は、KORニューロンが関与する生殖系のフィードバック調節では、KORニューロンが直接的に末梢の女性ホルモンの情報を受け取って行っているのではなく、KNDyニューロンからの情報をKORニューロンが受け取ることにより、フィードバック調節がおこなわれることを示唆している。

全球刺激激素释放激素（GNRH）脉冲分泌控制，这对于维持凝胶，卵泡的发育和精子的形成至关重要，这是kndy神经元的负责，这是在下丘脑弓核中。然而，迪诺尔芬的靶细胞是kndy神经元分泌的被抑制的神经递质的靶细胞，尚不清楚。因此，这项研究旨在阐明表达dinolphin受体的神经细胞的现实。在2015财年，计划在本研究中使用的Kor符号转基因大鼠可以使用并检查符号的特异性并确定了金星阳性细胞的细胞特征。该转基因大鼠的创建是为了在Kor启动子控制下表达荧光蛋白金星基因。金星的表达在大脑皮层，一个室内核和内核上很高，并且在弓形核和核心脑边界处也得到了证实。为了鉴定这些金星阳性细胞的细胞特性，我们使用免疫组织化学染色方法使用细胞标记蛋白进行分析。首先，它在金星和Neurocell Marker Neun之间进行了免疫双重的影响。金星和诺恩被揭示出它们是重复的，事实证明金星是在神经细胞中表达的。接下来，进行了金星和亲吻肽（KISS）的免疫重复染色。结果，金星和吻位于不同的细胞中。研究前透露，Kor并未出现在Kiss Neuron中。从这些事实中，我们能够确认金星表达特异性的一端。除此之外，维纳斯和ERα的免疫菌都表明，金星和ERα不在。结果是，在KOR神经元的生殖反馈调整中，KOR神经元没有直接接收有关外围女性激素的信息，而是通过KOR神经元从KNDY神经元获得信息。

项目成果

Aging-induced changes in sex-steroidogenic enzymes and sex-steroid receptors in the cortex, hypothalamus and cerebellum

• DOI: 10.1007/s12576-015-0363-x
• 发表时间: 2015-02
• 期刊: The Journal of Physiological Sciences
• 作者: Arisa Munetomo;Y. Hojo;Shimpei Higo;A. Kato;Kotaro Yoshida;T. Shirasawa;Takahiko Shimizu;A. Barron-A.-B