移植片対宿主病反応増強を目的とした遺伝子治療法の開発

开发旨在增强移植物抗宿主疾病反应的基因疗法

基本信息

批准号：
06671072
负责人：
谷憲三朗
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

骨髄移植後の再発性白血病に対する遺伝子治療法開発を目的にこれ迄2つの方向性で臨んできている。すなわち(1)マウス株化白血病細胞WEHI3Bへの顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)ならびにTリンパ球表面マーカーCD28のリガンドであるB7-1遺伝子の導入をレトロウイルスベクター(MFG)を用いておこない、Balb/cマウスにおいてこれら遺伝子導入細胞の抗腫瘍免疫誘導能を検討した。これによるとBalb/cマウスに予め、これら遺伝子導入WEH13B細胞を放射線照射後、5×10^6個ずつ腹部皮下にワクチンとして接種し、2週間後に親株であるWEHI3細胞を1×10^6個背部に接種(チャレンジ)したところ、GM-CSFやB7-1遺伝子導入細胞をワクチンとして接種したマウス群においては、チャレンジとしてのWEHI3B腫瘍形成がコントロール群(放射線で不活化したWEHI3B細胞をワクチンとして接種した群)に較べ有意に妨げられ、白血病細胞へのGM-CSF,B7-1遺伝子導入により明らかにワクチン効果が増強されることがわかった。また、(2)放射線照射C57BL/10SCRマウスへのA/Jマウス骨髄移植に成功しており、現在この個体における至適GVHD誘導細胞数を検討している。但し、株化リンパ腫細胞EL4への遺伝子導入は予想以上に難航しており、現行のレトロウイルス,アデノウイルスベクターでは十分な遺伝子導入ができなかった為、現在アデノ随伴ウイルスベクターを用いて遺伝子導入効率を検討している。以上のように本年度の計画の中枢をなす部分の研究については明らかな成果が得られており、今後(2)への検討をさらに加えることで臨床応用への早期展開をはかっていく予定である。

到目前为止，他们一直在两个方向上工作，目的是开发骨髓移植后复发性白血病的基因疗法。也就是说，（1）使用逆转录病毒载体（MFG）的囊囊模中，对粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF）（GM-CSF），T淋巴细胞表面标志物CD28的配体（MFG）和替代抗性动物的囊性模型进行了表演。调查。 According to this, Balb/c mice were previously irradiated with these transgenic WEH13B cells, and 5×10^6 were vaccinated as a vaccine in the abdominal subcutaneously, and two weeks later, 1×10^6 of the parental strain WEHI3 cells were vaccinated (challenge) into the back of the mouse group, which was vaccinated with GM-CSF or B7-1 transgenic cells, as a vaccine, significantly与对照组相比，防止WEHI3B肿瘤形成是一种挑战（与对照组接种了辐射灭活的Wehi3b细胞作为疫苗接种），发现GM-CSF和B7-1基因转移到白血病细胞中清楚地增强了疫苗的作用。此外，（2）A/J小鼠的骨髓移植到辐射辐射的C57BL/10SCR小鼠中，目前正在研究该个体中GVHD诱导的细胞的最佳数量。然而，基因转移到淋巴瘤菌株细胞中EL4比预期的要困难得多，并且由于当前的逆转录病毒和腺病毒载体无法充分转移基因，因此我们目前正在考虑使用腺相关病毒载体的基因转移效率。如上所述，已经为构成今年计划核心的研究获得了明确的结果，并在将来进一步考虑（2），我们计划将早期开发到临床应用中。