腎癌に対する免疫遺伝子治療法強化を目的とした腫瘍プロテオミクス解析

肿瘤蛋白质组学分析旨在加强肾癌的免疫基因治疗

基本信息

批准号：
18659475
负责人：
谷憲三朗
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659475/
关键词：
vivo遺伝子治療腎癌遺伝子治療マイクロアレイ解析抗腫瘍免疫 RENCA細胞 GM-CSF 顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子プロテオミクス解析シクロフォスファミドインターロイキン2

项目摘要

Ex vivo免疫遺伝子治療は、現在までに世界中で多く試みられているが、第III相臨床研究に至っているプロトコールは、顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)を用いた前立腺癌に対する臨床研究など数種のみである。本邦に於いてわれわれはGM-CSF遺伝子導入自家腎癌細胞をワクチンとして用いた免疫遺伝子治療臨床研究を4人の第IV期腎癌患者を対象に実施した。この結果、患者体内にin vitro検査上腫瘍特異的免疫が誘導されたことが明らかになったが、腫瘍縮小効果に関しては遺伝子導入自家腎癌細胞ワクチンと低量インターロイキン2(IL-2)の全身投与の必要性が示唆された。また患者体内に抗腫瘍免疫が誘導されるものの、転移腫瘍サイズが大きい場合には、単独では効果が得にくいことも明らかとなった。この状況を克服することを最終目的に、本研究ではマウス腎癌細胞であるRenca細胞及びGM-CSF又はGFP遺伝子導入Renca細胞を移植したマウスの腫瘍形成試験において再現性をもって有意な腫瘍抑制を認めた時点(day 8)の腫瘍所属リンパ節(TDLN:Tutmor Draining Lymph Node)を採取し、先ずトランスクリプトーム解析を行う目的でマイクロアレイ解析法を用いて癌抑制効果に関連する遺伝子の同定を行った。マイクロアレイ解析の結果、マウスGM-CSF遺伝子導入Renca細胞を接種したマウスリンパ節に於いて高発現していた遺伝子198個の中から8遺伝子(Efemp 1、Ela 2、Tnfrsf 17、Slpi、Ccl 3、Ly6c、Cxcl 9、Samhd 1)に注目し、更に発現量の差の比較検討を行った。その結果、GM-CSF遺伝子導入Renca細胞接種マウスリンパ節で、有意な遺伝子発現を認めたSamhd1以外のこれら候補遺伝子が、GM-CSFの腫瘍増殖抑制効果を増強する重要な因子である可能性が示唆された。

迄今为止，全球范围内尝试过体内免疫基因治疗，但是只有少数导致III期临床研究的方案是使用粒细胞 - 巨噬细胞群刺激因子（GM-CSF）在前列腺癌中进行的临床研究。在日本，我们使用GM-CSF转染的自源性癌细胞作为四阶段IV肾癌患者的疫苗进行了免疫基因治疗的临床研究。该结果表明，在体外检查中诱导了患者体内肿瘤特异性免疫，但它表明肿瘤还原作用对于全身性转基因自源性肾癌细胞疫苗和低剂量白介素2（IL-2）是必不可少的。此外，尽管在患者体内诱导抗肿瘤免疫，但已经发现，如果转移性肿瘤大小较大，很难单独实现效果。 With the ultimate goal of overcoming this situation, in this study, tumor regional lymph nodes (TDLN) were collected at the time point (day 8) of which significant tumor suppression was observed in tumor formation tests in mice transplanted with mouse renal cancer cells and GM-CSF or GFP transfected Renca cells, and first, the tumor regional lymph nodes (TDLN) were collected at the time point当观察到明显的肿瘤抑制（第8天），并首先使用微阵列分析确定与癌症抑制作用相关的基因，以进行转录组分析。 Microarray analysis revealed that 8 genes (Efemp 1, Ela 2, Tnfrsf 17, Slpi, Ccl 3, Ly6c, Cxcl 9, Samhd 1) were focused on 8 genes (Efemp 1, Ela 2, Tnfrsf 17, Slpi, Ccl 3, Ly6c, Cxcl 9, and Samhd 1) from among 198 genes that were highly expressed in mouse lymph nodes接种了小鼠GM-CSF基因转基因Renca细胞，并进行了进一步的比较研究。结果表明，SAMHD1以外的其他候选基因在与GM-CSF基因接种的小鼠淋巴结中表现出明显的基因表达可能是增强GM-CSF肿瘤生长抑制作用的重要因素。