マウス生殖細胞に発現するSry(精巣決定遺伝子)関連遺伝子の単離とその解析

小鼠生殖细胞中表达的Sry（睾丸决定基因）相关基因的分离和分析

基本信息

批准号：
06660394
负责人：
金井克晃
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06660394/
关键词：
Sox 精子発生マウス

项目摘要

HMG(High Mobility Group)box domainは、転写調節に関与する新たなDNA結合蛋白のモチーフであり、現在までに、哺乳類の精巣決定を担うSryやリンパ球の分化に関与するLef-1,Tcf-1,Sox4、また酵母ではmating type遺伝子MatMc,MatA1、Ste11などを含め60種以上の遺伝子が報告されている。哺乳類の神経、免疫系や生殖細胞の分化過程においても、HMGbox遺伝子群、特にSry様のHMGbox(Sox)遺伝子の関与が示唆されている。我々は、生殖細胞系列で発現するSox9及びSox17遺伝子を単離した。この内、Sox17遺伝子は、2種類のmRNA isoformが存在し、N端側にひとつのHMG boxを有するSox17 formとalternativesplicingによりDNA結合能を持たないt-Sox17 formの2種類のcDNAが得られた。精巣におけるSox9、Sox17とt-Sox17の各々の発現様式について検討したところ、Sox9は、後期精母細胞に発現が認められ、Sox17は、精祖細胞から精母細胞、t-Sox17は、精母細胞から精子細胞に発現していることが明らかとなった。各Sox蛋白のDNA結合能を検討した結果、Sox9およびSox17は、Sryおよび他のSox蛋白と類似したDNA結合特異性を示すのに対し、t-Sox17のDNA結合能は認められなかった。以上の結果から、精子形成過程において複数のSox遺伝子群が生殖細胞系列に発現しており、さらに、減数分裂前後において、Sox17遺伝子は、alternative splicingにより機能の異なったisoformに変換されることが明らかとなった。

HMG (High Mobility Group) box 结构域是一种参与转录调控的新型 DNA 结合蛋白 1 Sox4 的基序，在酵母中已报道了 60 多个基因，包括交配型基因 MatMc、MatA1、Ste11 等。。 HMGbox 基因，尤其是 Sry 样 HMGbox (Sox) 基因，也被认为参与哺乳动物神经、免疫系统和生殖细胞的分化过程。我们分离了在种系中表达的 Sox9 和 Sox17 基因。其中，Sox17基因有两种类型的mRNA亚型，并获得了两种类型的cDNA：Sox17形式，其N端侧有一个HMG盒，以及t-Sox17形式，其N端侧没有一个HMG盒。通过选择性剪接实现 DNA 结合能力。当我们研究睾丸中Sox9、Sox17和t-Sox17的表达模式时，我们发现Sox9在晚期精母细胞中表达，Sox17在精母细胞和精母细胞中表达，t-Sox17在精母细胞中表达已经明确。该蛋白质从细胞表达到精子细胞。检查每种Sox蛋白的DNA结合能力的结果是，Sox9和Sox17显示出与Sry和其他Sox蛋白类似的DNA结合特异性，而t-Sox17不具有DNA结合能力。从以上结果可以清楚地看出，在精子发生过程中，种系中表达了多个Sox基因组，并且Sox17基因在减数分裂前后通过选择性剪接转化为具有不同功能的亚型。