卵成熟誘起ステロイドホルモンの細胞膜受容体遺伝子の単離と構造解析

卵母细胞成熟诱导类固醇激素细胞膜受体基因的分离及结构分析

基本信息

批准号：
06640870
负责人：
吉国通庸
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

魚類の卵成熟誘起ステロイドホルモン(MIH)受容体は細胞膜結合型の新しい型のステロイド受容体である。これまでにこのMIH受容体分子についての化学的な情報は全く得られていなかった。MIH受容体遺伝子の単離の手がかりを得る為に生化学的解析を行ない、MIH受容体を含む細胞膜画分中にアデニル酸シクラーゼ活性が定常的に発現しており、MIHの投与によりその活性が阻害されることを見出した。MIH受容体がアデニル酸シクラーゼと連関していることから、その仲介成分として予想されたGTP結合蛋白質(G蛋白質)の関与について解析し、MIH受容体は、三量体型G蛋白質複合体を介してホルモン情報を卵母細胞内部に伝達していることが分かった。MIH受容体と連関するG蛋白質は百日咳毒素感受性型であるが、そのサブタイプの同定までには至っていない。現在、サブタイプ特異的な抗G蛋白質抗体を用いて同定を行っている。G蛋白質と相互作用する細胞膜受容体遺伝子に共通してみられる塩基配列を元に設計したプローブを用いて、既にMIH受容体を発現している時期のメダカ卵母細胞から調製したmRNAからRT-PCR法により増幅された数種類のcDNA断片を得ている。現在、これらの塩基配列の解析を進めており、配列決定後、これらをプローブにして、既に調製済みのメダカ卵母細胞cDNAライブラリーからMIH受容体遺伝子の単離を開始する。

鱼 - 成熟的类固醇激素（MIH）受体是一种新型的细胞膜结合类固醇受体。到目前为止，还没有有关该MIH受体分子的化学信息。进行生化分析以获得MIH受体基因的线索，并且在包括MIH受体在内的细胞膜香水中不断表达腺苷酸环化酶活性，MIH的活性是其活性。抑制。由于MIH受体与腺苷酸的循环酶有关，因此分析了GTP组合蛋白（G蛋白）的参与，以分析经纪成分，而MIH受体则通过三体体G蛋白质复合物。在鸡蛋钩细胞内传播。与MIH受体联系的G蛋白是一种痛苦的咳嗽毒素敏感性，但尚未达到亚型的鉴定。目前，使用亚型特异性抗-g蛋白抗体鉴定它。 G蛋白与基于碱基序列设计的探针与细胞膜受体基因相互作用的G蛋白质，在MIH受体已经表达的时候，由Medaka卵母细胞制备的RT形成。通过PCR方法扩增的cDNA片段。目前，正在分析这些基本序列，并确定阵列后，它们将由已经制备的Medaka卵细胞cDNA文库中的MIH受体基因制成。