骨と歯の石灰化における基質小胞の役割

基质囊泡在骨和牙齿矿化中的作用

• 批准号: 04671127
• 负责人: 藤原 智子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyushu Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04671127/
• 关键词: Matrix vesicles; Alkaline phosphatase; Lactate dehydrogenase; 軟骨性骨化; 膜性骨化; エナメル芽細胞層; 歯胚象牙前質

基質小胞(Matrix vesicles:MV)は軟骨や歯の初期石灰化に関与するとされる小胞様細胞小器官で、特にその小胞膜には高いAlkaline phosphatase(ALP)活性が検出される。最近ラットの肋軟骨骨端部の成長層にはALPおよびLactate dehydrogenase(LDH)の両活性を含む基質小胞が存在するのに対し、静止層にはALPを含まずLDHのみを含む基質小胞様の小胞が存在することを明らかにした。またウシ歯胚象牙前質にもMVとは密度の異なるLDHを含む基質小胞様小胞が存在することを明らかにした。今年度は次のことを明らかにした。(1)ニワトリ骨端軟骨成長層を用いコラゲナーゼ処理後、分画遠心法によりMV画分を調製し、さらにMV画分をグリセロール密度勾配遠心分画を行い、密度の大きい小胞(A)と密度の小さい小胞(B)を分離した。両小胞ともLDH、ALPを含んでいたが、その活性比(LDH/ALP)は小胞Aは0.14、小胞Bは0.016と明らかに異なっていた。両小胞は電顕的に異なっていることを明らかにした。(2)基質小胞性石灰化を行わないといわれているエナメル芽細胞層にもALPを含まずLDHのみを含む小胞があることを明らかにした。(3)これまで基質小胞に関する生化学的な研究はすべて軟骨性骨化部位に関する研究であったが、我々は膜性化骨部位であるマウスおよびウシ胎仔の頭蓋骨の基質小胞画分に基質小胞とは異なり、ALPを含まずLDHを含む基質小胞様小胞が存在することを明らかにした。このLDHは細胞の形質膜や細胞内オルガネラに由来したものではなく、また人工的な産物でなく、in vivoで形成されたものであることを明らかにした。このことにより、LDHを含む基質小胞様小胞が膜性化骨部位に普遍的に存在することが示唆された。

基质囊泡（MV）是囊泡样细胞器，据说与软​​骨和牙齿的早期钙化有关，尤其是在囊泡膜中检测到高碱性磷酸酶（ALP）活性。最近，我们透露，含有ALP和乳酸脱氢酶（LDH）活性的底物囊泡存在于大鼠的costal骨软骨二聚体的生长层中，而底物囊泡样囊泡不含Alp，仅包含ALP，仅存在LDH，而LDH仅存在于休息层中。还揭示了牛皮细菌前丁丁素中存在的含有与MV的密度不同的底物囊泡样囊泡。今年，已经揭示了以下内容：（1）胶原酶处理后使用鸡肉表周期软骨生长层处理后，MV馏分是通过分裂离心制备的，并进一步将MV分数进一步在甘油密度梯度中进一步离心，以分离大密度囊（A）和小密度叶（a）和小密度叶（B）。两个囊泡都包含LDH和ALP，但它们的活性比（LDH/ALP）与囊泡A的0.14明显不同，囊泡B的0.016均不同。 （2）据揭示了牙釉质爆炸层（据说不经历底物囊泡钙化）还包含不包含ALP且仅包含LDH的囊泡。 (3) All biochemical studies on substrate vesicles have been conducted on the site of cartilage ossification, but we have revealed that the substrate vesicle-like vesicles containing no ALP and no LDH are present in the substrate vesicle fraction of the skulls of mice and fetal bovine, which are membranous bone sites, unlike substrate vesicles.已经表明，该LDH不是源自细胞或细胞内细胞器的质膜，而不是人造产品，而是在体内形成。这表明含有LDH的底物囊泡样囊泡普遍存在于膜骨位点。

项目成果

Kitamura,C.: "The presence of resicles containing laitate dehydrogenase in the ameloblast layer of bovine enamel organ" Arch.Oral.Biol. in press. (1992)

Kitamura,C.：“牛釉质器官的成釉细胞层中存在含有乳酸脱氢酶的水泡”Arch.Oral.Biol。

Kitamura,C.: "Presence of vesicles containing lactate dehydrogenase in the dentin of bovine tooth germes" J.Dent.Res.70. 1444-1446 (1991)

Kitamura,C.：“牛牙胚牙本质中含有乳酸脱氢酶的囊泡的存在”J.Dent.Res.70。

Naito,T.: "Presence of lactate dehydrogenase-containing vesicles in an intramembraneus assifying tissue-new-born mouse calvaria" Calcified Tissue Int. in press. 52. (1993)

Naito,T.：“新生小鼠颅骨膜内组织中存在含有乳酸脱氢酶的囊泡”钙化组织国际。

Hosokawa,R.: "Lactate dehydrogenase isoenzymes in matrix vesicles" Bone and Mineral. 17. 177-181 (1992)

Hosokawa,R.：“基质囊泡中的乳酸脱氢酶同工酶”《骨骼和矿物质》。