細菌クオラムセンシングの歯肉縁下バイオフィルム形成に果たす役割の解析

细菌群体感应在龈下生物膜形成中的作用分析

基本信息

批准号：
14657544
负责人：
天野敦雄
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、歯周病菌Porphyromonas gingivalisの有するクオラムセンシングシステムの存在意義を探究し、このシステムが歯肉縁下バイオフィルムの形成にどのように影響しているか、また線毛などの病原因子の遺伝子制御にどのように関与しているかを研究する足掛かりを得ようとするものである。我々はP gingivalisのクオラムセンシングシステムの存在とその遺伝学的バリエーションを確認するところから研究をスタートさせた。1.P.gingivalisのクオラムセンシングシステムの検出系の構築2種類のクオラムセンシングシステムを備えているVibrio harbeyi BB120,BB170,BB886株の分与を受け、クオラムセンシングシステムの検出系を確立した。テストするP.gingivalisの培養上清試料を加え、オートインデューサーによる発光をルミノメーターで検出することが可能となった。2.P.gingivalisのクオラムセンシングシステム遺伝子のクローニングP.gingivalisのクオラムセンシングシステム遺伝子をPCRによりクローニングを行い、クオラムセンシングシステム遺伝子欠損ミュータント株を作成した。3.P.gingivalisクオラムセンシングシステム遺伝子の発現P.gingivalisクオラムセンシングシステム遺伝子の発現とバイオフィルム形成との間には明確な関連惟は認められなかった。また、バイオフィルム培養の菌とプランクトニック培養の菌との上皮細胞への付着・侵入とクオラムセンシングシステム遺伝子の発現についても検討を加えている

在这项研究中，我们研究了牙周病细菌牙龈卟啉单胞菌所拥有的群体感应系统的重要性，并研究了该系统如何影响龈下生物膜的形成，以及负责菌毛等致病因素的基因。为研究它如何参与控制奠定基础。我们的研究始于确认牙龈卟啉单胞菌中群体感应系统的存在及其遗传变异。 1.牙龈卟啉单胞菌群体感应系统检测系统的构建我们获得了哈贝伊弧菌BB120、BB170和BB886菌株，这些菌株均配备有两种类型的群体感应系统，并建立了群体感应系统检测系统。。添加待测牙龈卟啉单胞菌培养物上清液样品后，可以使用光度计检测自诱导剂产生的发光。 2.牙龈卟啉单胞菌群体感应系统基因的克隆通过PCR技术克隆牙龈卟啉单胞菌群体感应系统基因，建立缺失群体感应系统基因的突变株。 3.牙龈卟啉单胞菌群体感应系统基因的表达牙龈卟啉单胞菌群体感应系统基因的表达与生物膜形成之间没有明确的关系。我们还在研究生物膜培养细菌和浮游培养细菌对上皮细胞的粘附和侵袭以及群体感应系统基因的表达。