C57BL/6とC3H/He間でのコンソミックマウス系統の作成

C57BL/6 和 C3H/He 间体小鼠品系的创建

基本信息

批准号：
14657236
负责人：
吉川武男
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657236/
关键词：
コンソミックマウス複雑遺伝疾患精神疾患近交系マウス C57BL 6 C3H He 近郊系マウス

项目摘要

コンソミックマウスとは、受容系統のある染色体丸ごと1本を供与系統の染色体で置き換えたマウスで、コンソミツク系統はこれまで一般的だったコンジェニック系統、リコンビナント・インブレッド系統の弱点を克服し利点を合わせ持ったものと言える。コンソミック系統が樹立されると、精神疾患を含めて多因子疾患の原因遺伝子の絞り込み・遺伝子の単離に非常に役立つ。我々は、C57BL/6(B6)とC3H/He(C3)マウス近交系間でそれぞれを受容系統、供与系統とした「表」・「裏」のコンソミックラインを染色体2番、4番、6番、8番、11番、14番、17番、X染色体について作成中である。N2世代、N4世代で「best male/female」個体を選択する「スピードコンソミック」という手法を用いるため、N5世代で目的の染色体がほぼ100%置き換わった系統が得られる予定である。本年度は、N3世代個体を親系統に戻し交配して各染色体につき以下の数の雄を確保した(「表」+「裏」):染色体2番-51匹、4番-82匹、6番-92匹、8番-95匹、11番-107匹、14番-109匹、17番-70匹。全個体をゲノムワイドマーカー(80個のマイクロサテライト)を用いてタイピングして、best male(N4世代)を各染色体あたり2匹ずつ選択した。X染色体に関しては、N2世代を307匹(「表」+「裏」)作成し、やはり80個のゲノムワイドマイクロサテライトマーカーを用いてタイピングし、best female個体を「表」と「裏」につき各2匹ずつ選択した。コンソミックマウスの作成は非常に大きなプロジェクトであり、本研究の2年間で我々の技術の確からしさが証明され、最終段階まで7合目あたりという地点に無事たどり着いた。この段階で、常染色体ラインについては精子凍結、X染色体ラインに関しては4分割胚を凍結保存し、将来に備えた。

康体小鼠是一种小鼠，其中来自受体品系的一条完整染色体被来自供体品系的染色体取代。康体小鼠克服了传统同系小鼠和重组近交品系的优点，可以说您拥有它。一旦建立了共体菌株，它将对于缩小和分离包括精神障碍在内的多因素疾病的致病基因非常有用。我们分别使用受体系和供体系在 C57BL/6 (B6) 和 C3H/He (C3) 小鼠自交系之间的 2、4 和 6 号染色体上创建了染色体系，目前正在为 8、11、14 号染色体创建。、 17 和 X。因为我们使用一种称为“speed consomic”的方法来选择N2和N4代中“最好的雄性/雌性”个体，所以我们计划获得一个菌株，其中几乎100%的所需染色体已被替换N5一代。今年，我们将 N3 代个体与亲本系回交，并确保每个染色体（正面 + 背面）的雄性数量如下：2 号染色体 51 只雄性，4 号染色体 82 只雄性，6 号染色体 82 只雄性。-92动物、8-95号动物、11-107号动物、14-109号动物、17-70号动物。所有个体均使用全基因组标记（80 个微卫星）进行分型，并为每条染色体选择两个最好的雄性（N4 代）。关于X染色体，我们创建了307只N2代动物（“正面”+“背面”），使用80个全基因组微卫星标记对它们进行分型，并为“正面”和“背面”选择了最好的雌性个体。。创造康体小鼠是一个非常大的项目，两年的研究证明了我们技术的可靠性，我们安全地到达了最后阶段，即第七站附近。在此阶段，常染色体系的精子被冷冻，X染色体系的四部分胚胎被冷冻保存，为未来做好准备。