アナフィラキシーショックにおける肺血管内皮細胞の放出物質検索

寻找过敏性休克期间肺血管内皮细胞释放的物质

• 批准号: 14657110
• 负责人: 吉岡 尚文
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657110/
• 关键词: アナフィラキシー; ショック; 不適合輸血; 内皮細胞; サイトカイン; 抗原・抗体反応; 抗原抗体反応

様々なアナフィラキシーショックのうち、抗原・抗体反応に起因するショックは例えば、IgA欠損症や他の血漿蛋白欠損患者への輸血でしばしば経験されることである。本研究はこれに類似するモデルをin vitroで作成し、肺動脈由来内皮細胞の挙動を検索することにより、その病態の解明と治療への応用を検討することを目的とした研究である。平成14年度の実験では、ヒト肺動脈由来の市販内皮細胞を培養し、コンフルエントになった時点で、抗ヒトハプトグロビン(Hp)を加えインキュベートし、次いで抗原液(ヒトHp)を添加後、細胞培養上清中に放出されると予想される様々な物質を経時的に測定した。その結果、ICAM-1とVCAM-1に放出量の変化が認められたことから、平成15年度は抗原や抗体の容量依存性の検討、さらに培養液中に白血球細胞やTNFαを加え、炎症反応を促進させる系を作成した。この系を用い、ICAM-1とVCAM-1の濃度を1時間ごとに6時間迄、12時間ごとに48時間迄経時的に測定し、抗原や抗体の量、白血球細胞や、TNFαの影響を検討したが、再現性のあるデーターは得られなかった。むしろ、細胞培養液に異物(ある種のヒト血清蛋白や抗体であるウサギ血清)を加えることで、細胞は刺激されてICAM-1とVCAM-1のような物資を放出したのではないかということが示唆される結果を得た。肺動脈の内皮細胞は何らかの物質を放出している可能性が示唆されたが、今回の研究からはアナフィラキシーショックと関連ある重要因子の特定や内皮細胞の確定的反応を確認することは困難であった。

在各种过敏性休克中，经常会出现由抗原抗体反应引起的休克，例如，在对IgA缺乏或其他血浆蛋白缺乏症患者的输血中。这项研究旨在阐明病理学并使用它来治疗治疗，并在体外创建类似的模型，并寻找源自肺动脉的内皮细胞的行为。在2002年的实验中，培养了源自人肺动脉的市售内皮细胞，当细胞汇合时，添加了抗人类抗凝胶蛋白（HP）并孵育，然后添加抗原溶液（人类HP），并预期将预期将各种物质释放到细胞培养培养的超级纳入超级纳入超级纳入超级natertant的超级时间。结果，在ICAM-1和VCAM-1中观察到了释放量的变化，因此在2003年，我们研究了抗原和抗体的体积依赖性，还将白细胞细胞和TNFα添加到培养基中，以创建促进炎症反应的系统。使用该系统，在每小时最多6个小时和每12小时最多48小时的时间内测量ICAM-1和VCAM-1的浓度，并检查了抗原和抗体的量，白细胞细胞和TNFα的效果，但没有获得可重复的数据。相反，我们发现结果表明，通过在细胞培养基中添加异物（兔血清，某种类型的人血清蛋白或抗体），可能已经刺激细胞释放诸如ICAM-1和VCAM-1之类的供应。已经提出，肺动脉中的内皮细胞可能会释放某些物质，但是当前的研究使得很难识别与过敏性休克相关的关键因素，并确认内皮细胞的明确反应。

项目成果

Arakawa, M 共著: "Epitope analysis of human lmmunoglobulin D with mouse monoclonal anti-Fab chain antibody"Clinica Chemica Acta. 319. 1-8 (2002)

Arakawa，M 合著者：“用小鼠单克隆抗 Fab 链抗体对人免疫球蛋白 D 进行表位分析”Clinica Chemica Acta. 319. 1-8 (2002)