脂質膜輸送機構の解析

脂质膜转运机制分析

基本信息

批准号：
14657009
负责人：
稲垣暢也
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、ABC(ATP-binding cassette)蛋白のなかでも特に脂質膜輸送に関連すると予想されるABCAサブファミリーに属するABCA2とABCA3の機能を明らかにすることによって、脂質の膜輸送機構を明らかにすることを目的とする。申請者らはこれまでに、ABCA2がオリゴデンドロサイトに特異的に発現すること、ABCA3が、肺胞II型細胞のサーファクタント分泌ベジクルであるlamellar bodyに特異的に発現することを明らかにしてきたが、平成14年度には、1)A2蛋白の発現が、ラット脳の発達段階において、生後特に2週〜3週目にかけて急速に認められ、オリゴデンドロサイトのミエリン形成とよく一致することをABCA2とmyelin basic protein(MBP)の2重染色により明らかにした(Tanaka, et al. J. Comp. Neurol.2003)。この結果は、ABCA2がミエリン形成時においてミエリンの主たる構成成分である脂質の輸送に関与していることを強く示唆している。2)ABCA2遺伝子ノックアウト(KO)マウスを樹立した。ホモKOマウスについても解析可能になった。3)界面活性剤のBrij 98を用いることにより、ABCA2が細胞膜上の脂質膜ドメイン(ラフト)に存在することを明らかにした(投稿中)。4)ABCA3のKOマウスを樹立する目的で、マウスABCA3遺伝子を単離し、ターゲティングベクターを作成した。5)ABCA3蛋白の発現が、サーファクタントの合成と同様に、ラットの出生直前に急激に増大すること、グルココルチコイドにより発現が誘導されることを明らかにした。この結果は、ABCA3がサーファクタントの主たる構成成分である脂質の輸送に関与していることを強く示唆している

在这项研究中，ABC（ATP结合盒）蛋白阐明了ABCA2和ABCA3属于ABCA亚家族的功能，该功能与脂质膜转运特别相关，以阐明脂质膜运输机制。做。迄今为止，申请人已经表明，ABCA2是针对寡头位点的，并且ABCA3在层状体中特别表达，这是ALVEOLI II细胞的表面性蔬菜，在FY2002中，A2蛋白的表达很快。大鼠大脑，尤其是在出生后的第2周至第三周，与少突endro位点的米尔林形成非常一致。 comp。该结果强烈表明，当形成ABCA2时，ABCA2参与了Mierin的主要成分的脂质的运输。 2）建立了ABCA2基因敲除（KO）小鼠。 HOMO KO小鼠也可以分析。 3）表面活性剂Brij 98的使用表明，ABCA2存在于细胞膜上的脂质膜（RAFT）中（在张贴中）。 4）为了建立ABCA3 KO小鼠，分离了小鼠ABCA3基因以创建靶向载体。 5）揭示了ABCA3蛋白的表达在大鼠出生之前迅速增加，如表面活性剂的合成，并且该表达是由糖皮质激素诱导的。该结果强烈表明ABCA3参与了脂质的运输，这是表面活性剂的主要成分。