コンビナトリアルバイオコンバージョンによる新規生理活性物質ライブラリー創製の試み

尝试使用组合生物转化创建新的生物活性物质库

基本信息

批准号：
14656046
负责人：
神崎浩
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

本来生物が生産しない化合物を生物変換で合成する研究は,生理活性物質生産において幾つか知られている。しかしこのような反応は,目的物が決まった上で選抜されたものであり,ランダムにバイオコンバージョンを行い,その結果得られる化合物群をラィブラリーとする研究はほとんど行われていない。現在の医薬などの生理活性物質探索では,ハイスループットスクリーニング(HTS)が全盛であり,そのための化合物ライブラリーの構築が不可欠とされている。そのためにコンビナトリアル合成が行われているが,これもあくまで構造予測のうえでのライブラリー構築である。そこで,本研究では,2種類の生物の持つ二次代謝産物生産能を組み合わせて,1種の生物では生産不可能な化合物を合成する『コンビナトリアルバイオコンバージョン』という手法の基礎的な検討を行った。我々は既に,糸状菌Aspergillus ustusが生産する細胞分裂阻害物質phenylahistinを放線菌Streptomyces albulusが有している環状ジペプチド脱水素酵素系で処理すると,出発物質のさらに1000倍以上も強力な活性を有する新規化合物dehydrophenylahistinが生成することを明らかにしており,昨年度は,この反応をより効率よく行う技術開発を試み,2種の微生物を寒天培地上で培養し,途中で微生物を移し替える培養法により,目的物質の生産が可能となった。本年度は寒天培養より様々な利点を有する液体培養による方法の確立を試みた。液体振とう培養や,液体静置培養ではPhenylahistinの生産はほとんど見られなかったこと,菌の移し替えを考えると膜状で菌体を生育させるのが望ましいことから,岡山大学工学部中西教授が考案された膜面液体培養による生産を試みたところ,寒天培養より生産性の高い条件が確立できた。以上のことから,寒天培養あるいは膜面液体培養で二種の微生物を培養し,培養途中にそれらを移し替える二段階醗酵により,新規の化合物が生産できると期待される。

在月经物质生产中已知的研究最初不是生物转化产生的生物学化合物。但是，在固定物体之后选择了这种反应，很少有研究随机执行生物体现，从而从中获得了所得化合物组。为了寻找生理和活性物质，例如药物，高环文本筛选（HTS）正在如火如荼地进行，为此目的，建造复合库是必不可少的。因此，正在执行组合的组合，这也是用于结构预测的图书馆构造。因此，在这项研究中，“组合生物惯例”方法的基本研究结合了两种类型的生物的二级代谢产物生产能力，是由一个物种无法产生的化合物组成的。当机械性经济体（一种环状功能障碍）是细胞分裂抑制剂中的循环症状时，我们已经具有超过1000倍的功能。我们试图开发技术以更有效地执行这种反应，在琼脂培养基上进行了两种类型的微生物，并在途中转移了微生物。今年，我们试图通过比琼脂培养物具有不同优势的液体培养方法来建立一种方法。冈马大学教授中尼希（Nakanishi）教授发明了在液体摇动培养物和液态静态培养物中很少见到苯硫蛋白的产生，并且考虑在尝试通过薄膜传递后，希望以膜形状生长细菌。液态培养，比琼脂培养物建立了高生产条件。从上面可以预期，可以通过在琼脂培养物或膜表面液体培养中培养两种类型的微生物并在培养过程中转移它们来产生新的化合物。