黄体化ホルモン受容体の活性化機構の解明

阐明黄体生成素受体的激活机制

基本信息

批准号：
07671129
负责人：
小杉眞司
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

家族性男子思春期早発症(FMPP)において、LH(黄体化ホルモン)受容体において第6膜貫通ヘリックスの点変異Asp^<578>→Gly(GAT→GGT)を活性化型変異として初めて同定し、表現実験によって直接の病因であることを証明したが、更に多くの家系を検索することにより、同じく第6細胞膜貫通部分にThr^<577>→Ile(ACC→ATC)を、第6細胞膜貫通部分と第3細胞内ループに境界部分にMet^<571>→Ile(ATG→ATA)をやはり点変異として同定し、表現実験によってconstitutive activationを起こすことを確認し、それぞれの家系で直接の病因となっていることを証明した。さらに、男子思春期早発症の孤発例(SMPP)においてAsp^<578>→Tyr(GAT→TAT)を同定し、表現実験を行ったところ、それまでFMPPで同定されたものより著しく強いcAMP系のconstitutive activationとそれまでは認められなかったイノシトールリン酸系のconstitutive activationをも起こすことが明らかとなった。この症例は、通常のFMPPよりも早い発症とより強い臨床症状、睾丸組織におけるLeydig細胞の著しい過形成が示され、genotype-pathology-phenotypeの一致が示された。Asp^<578>の重要性について、他のアミノ酸残基について検討した。その結果、この部位のAspの側鎖によって形成される水素結合がLH受容体を非活性化状態に維持するために必要なこと(すなわち水素結合を形成できないアミノ酸への置換ではconstitutive activationが起こる)、さらにTyrやPheなどの大きなアミノ酸への置換ではより強いconstitutive activationが起こり、7つの膜貫通ヘリックス相互間の非活性化状態維持のための他の構造にも影響すること明らかとなった。

在家族性男性青少年（FMPP）的早期发作中，第六个跨膜螺旋的点突变是在LH（黄体激素）受体处的激活突变，并证明这是通过表达实验的直接致病性。但是，通过搜索更多家庭，我们还确定了第六个跨膜部分中的thr^<577>→Ile（ACC→ATC），并在第六个跨膜部分的边界和第三个本质上的无点突变中确认了该构成的行动，并在第六个跨膜部分的边界中遇到了^<571>→ile（atg→ata）每个家庭的致病性。此外，在一个单独的男性青春期（SMPP）中鉴定出ASP^<578>→Tyr（GAT→TAT）并进行了表达实验，并且发现它还引起了与以前未经FMPP，inositolodol磷酸盐系统组成型激活相比，它还引起了更强的cAMP系统组成型激活。该病例显示出比正常FMPP的发作和更强的临床症状，睾丸组织中Leydig细胞的显着增生以及基因型 - 病理 - 表型匹配。检查了其他氨基酸残基的ASP^<578>的重要性。结果，据揭示了由ASP在本网站的侧链形成的氢键对于将LH受体保持在失活状态（即用氨基酸替代的替代氢）的氢键导致构成激活的氨基酸的替代）是必要的跨膜螺旋。