薬用植物におけるフラボノイド類の区別的発現機構

药用植物中黄酮类化合物的差异表达机制

• 批准号: 05680497
• 负责人: 野口 博司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05680497/
• 关键词: アントシアン; フラボノイド; クズ; エリレター; 生合成

パセリのCHS制御領域-46〜+8(ATG)とBoxI-IIをGUSにつなぎPUC-19に組み込んだpBTu1-2、ベチュニアのCHS-Aの-800までをCATに繁いだ遺伝子、同様にして金魚草のCHSの-357までをPUC-19に組み込んだ遺伝子をブドウの色素生産株に導入しそれぞれの発現の比較を行った。対照としてCAMV35Sプロモーターを用いた。この発現を調べたところ強弱はあるもののいずれも発現した。さらにキントキニンジンの培養系で2、4Dを加えた増殖培地中と2、4Dを除いた分化培地中で発現を調べたところ何れでも発現が見られ、果たして以上の実験がアントシアンの生産に関与する制御領域のポジティブなコントロールとなるか否か、再考察が必要となった。さらにこれらをタバコ培養系に導入したところイーストエキス処理の有無にかかわらず発現が誘導された。最近欧米では上記の遺伝子をフラボノイドをファイトアレキシンとしないタバコの培養細胞に加えて発現の見られることが報告されており、植物の外界からの刺激に対する応答の複雑さの一環と思われる。クズ培養細胞より刺激に対応してえられたCHSライブラリーから独立なCHSを検索したところ、独立なクローン1-14が得られた。この14はインゲンの5上流と極めて相同性が高く、エリシター由来であることをうなずかせるものだったが、ダイズのchs-1、chs-2との相同性は低く、またパセリのCHSとの比較では全く近縁性がないことは上の結果と考え合わせると、刺激に対応する配列はひとつでなくより緻密な解析を行わなくては植物の応答性を論じることは難しいという結果となった。

pBTu1-2，将欧芹的 CHS 控制区 -46 至 +8 (ATG) 和 Box I-II 连接到 GUS 并将其整合到 PUC-19 中，以及 CAT 中丰富的基因，包括桦木 CHS-A 的 -800因此，我们将金鱼草的CHS高达-357的CHS掺入PUC-19中的基因导入到葡萄色素生产菌株中，并比较了各自的表达。 CAMV35S启动子用作对照。当我们研究这种表达时，所有这些表达都被表达，尽管强度不同。此外，当我们研究人参培养系统中含有2和4D的生长培养基和不含2和4D的分化培养基中的表达时，在两种情况下都观察到表达，表明上述实验确实涉及花青素的产生有必要重新考虑是否可以作为监管区域的积极控制。此外，当将它们引入烟草培养系统时，无论是否存在酵母提取物处理，都会诱导表达。最近，欧美报道上述基因在不使用类黄酮作为植物抗毒素的培养烟草细胞中表达，这似乎是植物对外界刺激反应复杂性的一部分。当我们从培养的葛细胞响应刺激获得的 CHS 文库中搜索独立的 CHS 时，我们获得了独立的克隆 1-14。该14与菜豆上游的5具有极高的同源性，表明其源自引发子，但与大豆的chs-1和chs-2同源性较低，并且与欧芹的CHS也具有较高的同源性。结果表明，比较中根本没有接近性，结果是只有一个序列对应于刺激，并且在不进行更详细的分析的情况下很难讨论植物的响应性。