逆ミセルに可溶化されたタンパク質の迅速な回収法

反胶束中溶解的蛋白质的快速回收方法

基本信息

批准号：
05650768
负责人：
片岡健
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Osaka Prefecture University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

逆ミセル抽出法によるタンパク質の分離・濃縮操作においては、原料水相から逆ミセル相へ抽出されたタンパク質を別の水相へ逆抽出(回収)しなければならない。AOT-イソオクタン逆ミセル相からのリゾチームの逆抽出速度は、正抽出に比べて非常に遅いことがわかっている。本研究では、この逆抽出速度を速める手法について検討を行い、以下の知見を得た。1.液液平面接触撹拌セルを用い、リゾチームを1mg/cm^3の濃度で可溶化させたAOT-イソオクタン逆ミセル相から1kmol/m^3KCI水溶液(pH=11.5)への逆抽出速度を15℃から40℃で測定した。逆ミセル相から水相へのリゾチームの移動速度は、二相界面でのリゾチームの脱離に伴う抵抗によって支配され、この脱離速度は温度の上昇と共に増大し、40℃では25℃の1.7倍に加速されることがわかった。2.回収水相にアルコール類(エタノール、イソプロパノール、2-メチル-2-プロパノール)を0〜10VO1%の範囲で添加し、リゾチームの逆抽出速度を測定した。いずれのアルコールにおいても、脱離速度はアルコール添加量の増大と共に加速されたが、2-メチル-2-プロパノールが最も有効であり、10VO1%においては無添加の14倍となり、正抽出における界面での可溶化速度にほぼ匹敵するまで加速されることが判明した。今後は、タンパク質の速やかな回収ならびに逆ミセル抽出法による分離プロセス全体の立場に基づき、タンパク質の回収に有効な液液二相接触方式に関する装置工学上の観点からの検討が必要であろう。

在通过反向胶束萃取方法对蛋白质的分离和富集中，从原材料相提取到相对的胶束相必须反向（恢复）到另一个水相。众所周知，Liza团队从AOT-ISOCUTAN反向胶束的反向提取速度比正提取要慢得多。在这项研究中，我们检查了加速这种反向提取速度的方法，并获得了以下知识。 1。从AOT-ISOCTAN反向胶束相位，1kmol/m^3KCI水溶液（pH = 11.5）的反向提取速度为1kmol/m^3kci（pH = 11.5），该反向胶束相位以1 mg/cm^3的速率求解液态平面与1 mg/cm^3浓度搅拌。失败者团队从相反的梅尔到水相的速度速度由两相一侧的失败者团队辞职的抵抗力主导，而这种决心速度随温度的升高，为1.7倍，是25倍。 °C在40°C处得到加速。 2。在0到10VOS的阶段，将酒精（乙醇，异源二醇，2-甲基-2-丙醇）添加到水相中，并测量了Liza团队的反向提取速度。在两种酒精中，随着酒精的增加量增加，辞职速度都得到了加速，但是2-甲基-2-丙醇是最有效的，而在10VO1％中，它是无添加剂的14倍，而在阳性提取领域则是。将来，有必要根据蛋白质的迅速恢复和通过反向胶束提取方法来从设备工程方法的角度检查两种接触方法，该方法有效地恢复了蛋白质和整个分离过程。