逆ミセルに可溶化されたタンパク質の迅速な回収法

反胶束中溶解的蛋白质的快速回收方法

基本信息

批准号：
05650768
负责人：
片岡健
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Osaka Prefecture University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

逆ミセル抽出法によるタンパク質の分離・濃縮操作においては、原料水相から逆ミセル相へ抽出されたタンパク質を別の水相へ逆抽出(回収)しなければならない。AOT-イソオクタン逆ミセル相からのリゾチームの逆抽出速度は、正抽出に比べて非常に遅いことがわかっている。本研究では、この逆抽出速度を速める手法について検討を行い、以下の知見を得た。1.液液平面接触撹拌セルを用い、リゾチームを1mg/cm^3の濃度で可溶化させたAOT-イソオクタン逆ミセル相から1kmol/m^3KCI水溶液(pH=11.5)への逆抽出速度を15℃から40℃で測定した。逆ミセル相から水相へのリゾチームの移動速度は、二相界面でのリゾチームの脱離に伴う抵抗によって支配され、この脱離速度は温度の上昇と共に増大し、40℃では25℃の1.7倍に加速されることがわかった。2.回収水相にアルコール類(エタノール、イソプロパノール、2-メチル-2-プロパノール)を0〜10VO1%の範囲で添加し、リゾチームの逆抽出速度を測定した。いずれのアルコールにおいても、脱離速度はアルコール添加量の増大と共に加速されたが、2-メチル-2-プロパノールが最も有効であり、10VO1%においては無添加の14倍となり、正抽出における界面での可溶化速度にほぼ匹敵するまで加速されることが判明した。今後は、タンパク質の速やかな回収ならびに逆ミセル抽出法による分離プロセス全体の立場に基づき、タンパク質の回収に有効な液液二相接触方式に関する装置工学上の観点からの検討が必要であろう。

在通过反向胶束提取的分离和浓缩蛋白的过程中，必须将从原始水相提取到反向胶束相的蛋白质被反摘取（恢复）到另一个水相中。与阳性提取相比，已经发现来自AOT-异辛烷反向胶束相的溶菌酶反向胶囊的反萃取速率非常慢。在这项研究中，我们研究了一种提高反萃取速度的方法，并获得了以下发现：1。使用液体液体平坦接触式搅拌搅拌细胞，从AOT-异常反向胶束相中提取的后萃取速率，其中溶菌酶以1 mg/cm^3至1KMOL/m^3kci = 3kci sice complation complation come come come come compe come come come come compie sepeelle seplase。到40°C。溶菌酶从相反的胶束相转移到水相的速率由两相界面处与溶菌酶解吸相关的电阻支配，这会随着温度的增加而增加，在40°C的增加和加速1.7倍，高于25°C。 2。将醇（乙醇，异丙醇，2-甲基-2-丙醇）添加到回收的水相中，在0至10 vo1％的范围内，并测量了溶菌酶的后萃取速率。在两种酒精中，随着添加的酒精量的增加，消除率都得到了加速，但是2-甲基-2-丙醇是最有效的，而在10VO1％处，发现在接口处的溶解度速率比无添加剂的溶解度高14倍，并且在互换过程中的溶解速率几乎相同。从现在开始，必须利用反向胶束萃取方法从设备工程的角度从设备工程的角度研究有效恢复蛋白质的有效恢复蛋白质的方法。