熱ショック蛋白(hsp)に対するT細胞免疫の研究

T细胞对热休克蛋白（hsp）的免疫研究

• 批准号: 03454173
• 负责人: 佐藤 昇志
• 金额: $ 3.97万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03454173/
• 关键词: 熱ショック; hsp 70; T細胞; 抗原提示; ペプチド; hsp family; hsc 73; brefeldin A; 細胞表面; 熱ショック蛋白; 70hsp; 70bsc; 形質転換; 癌遺伝子; 細胞障害性; リガンド

ストレス蛋白質、熱ショック蛋白質(hsp)は熱等のストレスにより生じた変性蛋白の処理、再生に働き、また、分子シャペロンとして様々な分子の輸送やアセンブリーに関わる重要な蛋白質である。我々は腫瘍抗原を解析する過程で、hspとT細胞との反応を発現した。我々はまず癌免疫の成立には細胞癌化に伴って発現(増量)する抗原が重要であると考え、ラットWFB非形質転換細胞の表面に陰性、かつWFBのH-ras癌遺伝子形質転換株(W31)に陽性の抗原を単クローン抗体067でとらえた。種々の解析によりこの抗体が実は70kDa heat shock cognate protein(hsc)を認識していることが判明した。宿主キラー細胞との反応をみると、CD4^-CD8^-、T細胞レセプターalphabeta^-のキラーT細胞(DNT)とW31細胞表面に発現したhsc70分子が反応していることが示唆された。つまりhsc70はtransfor-mation-associated antigenであり、しかも腫瘍拒絶抗原として宿主の特定のキラーT細胞(gammadelta型T細胞と推測される)と反応することが示された。この反応はさらにER-Golgiでの蛋白分子の会合阻害剤であるbre-feldin Aにより完全に抑制された。このことは、hsc70が細胞内の何らかのペプチドや蛋白との複合体の型でDNTに提示されていることを示唆した。さらに、W31細胞よりトリフロロ酢酸抽出によりペプチドを得、これを1%FCSで培養したW31(これはhsc70は細胞表面陽性であるがDNTにより障害されない)にパルスしたところDNTは1%FCSで培養したW31細胞に明らかな細胞障害性を示した。つい最近、hsc70とMHC class Iとの高次構造が酷似していることが報告されたが、我々の研究結果はhscの抗原提示分子としての可能性を直接支持する重要な実験事実と思われた。

应激蛋白和热休克蛋白（HSP）是重要的蛋白质，可作为治疗和再生的变性蛋白（例如热）产生的变性蛋白，并且也是与各种分子运输和组装有关的分子伴侣。在对肿瘤抗原的分析过程中，我们表达了HSP和T细胞之间的反应。首先，我们认为用细胞癌表达（增加）的抗原对于建立癌症的免疫力很重要，并且我们在大鼠WFB未转化细胞的表面上捕获了一种负抗原，而H-RAS致癌基因对H-RAS癌基因的阳性对WFB的抗体（W31）呈阳性，而单克抗体抗体却识别了这一热量767。蛋白质（HSC）。与宿主杀手细胞的反应表明，CD4^-CD8^ - 的杀伤T细胞（DNT）和T细胞受体字母^ - 与在W31细胞表面表达的HSC70分子反应。换句话说，HSC70是一种与天线相关的抗原，并且被证明与宿主中特定的杀伤型T细胞（可能是gammadelta型T细胞）反应为肿瘤排斥反应抗原。 Bre-feldin A（在ER-Golgi中蛋白质分子缔合抑制剂）完全抑制了这一反应。这表明HSC70以与细胞内某些肽或蛋白质的复合形式形式呈现给DNT。此外，通过提取三氟乙酸从W31细胞中获得肽，并将肽脉冲到在1％FC中培养的W31（HSC70是细胞表面阳性，但不受DNT受损），并且DNT在1％FC中培养的W31细胞中显示明显的细胞毒性。最近，据报道，HSC70和MHC I类的高阶结构非常相似，但是我们的发现似乎是直接支持HSC作为抗原呈递分子的潜力的重要实验事实。

项目成果

Konno,A.,Sato,N.,Yagihashi,A.,Torigoe,T.,Torimoto,K.,Hara,I.,Wada,Y.,Okubo,M.,Takahashi,N.,and Kikuchi,K.,: "Heat or stressーinducible transtormationassociated cell surface antigen on the activated Hーras oncogeneーtransfected rat fibroblast." Cancer Res.,.

Konno, A.、Sato, N.、Yagihashi, A.、Torigoe, T.、Torimoto, K.、Hara, I.、Wada, Y.、Okubo, M.、Takahashi, N. 和 Kikuchi, K. ,:“热或应激-激活的Heras癌基因上的诱导转化相关细胞表面抗原-转染的大鼠成纤维细胞。”

佐藤 昇志,田村 保明,岸 明彦,菊地 浩吉: "新しい腫瘍抗原ー熱ショック蛋白(heat shock proteins,hsp)" Medical Immunology, 7 (1992)

Noboru Sato、Yasuaki Tamura、Akihiko Kishi、Kokichi Kikuchi：“新肿瘤抗原-热休克蛋白（hsp）”医学免疫学，7（1992）

Nihei,T.,Sato,N.et al.: "Demonstration of selective protein complexes of p53 with 73 kDa heat shock cognate protein,but not with 72 kDa heat shock protein." Jap.J.Cancer Res.

Nihei,T.,Sato,N.et al.：“p53 与 73 kDa 热休克同源蛋白的选择性蛋白复合物的演示，但不与 72 kDa 热休克蛋白的选择性蛋白复合物。”

Sato,N.,Wada,Y.,Ikeda,H.,Takahashi,S.,Takashima,T.,Tsuboi,N.,Kishi,A.,Hirata,K.,and Kikuchi,K.,: "Role of Tumorーassociated antigens in induction of the specific killing by cytotoxic T lymphcytes in human autologous cancers." Jap.J.Cancer Res.,.

Sato, N.、Wada, Y.、Ikeda, H.、Takahashi, S.、Takashima, T.、Tsuboi, N.、Kishi, A.、Hirata, K. 和 Kikuchi, K.，：“肿瘤相关抗原在人类自体癌症中诱导细胞毒性 T 淋巴细胞特异性杀伤。”Jap.J.Cancer Res.,。

Nihei,T.,Sato,N.et al.: "Protein interaction of retinoblastoma gene product pRb110 with Mr 73,000 heat shock coqnate protein" Cancer Res.

Nihei,T.,Sato,N.等人：“视网膜母细胞瘤基因产物 pRb110 与 Mr 73,000 热休克同源蛋白的蛋白质相互作用”Cancer Res。