クローン技術を用いた血管病治療モデルの確立

利用克隆技术建立血管疾病治疗模型

• 批准号: 18659220
• 负责人: 栗原 裕基
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659220/
• 关键词: 核移植; クローン; ES細胞; 再生医学; 循環器疾患; エピジェネティクス; リプログラミング

本研究では、血管細胞由来のクローン胚からES細胞を樹立し、この体細胞核由来ES細胞(ntES細胞)の未分化性や分化特性について検討した。また、ntES細胞確立の機序に関連し、初期胚におけるエピジェネティック制御に関して、DNA維持メチル化機構を中心に研究を行った。1.マウスES細胞から血管内皮細胞に分化する細胞系列の各段階をドナー細胞として用いることにより、分化の進行初期の段階で核移植後の桑実胚/胚盤胞発生率が低下すること、分化に伴う核移植後のリプログラミング感受性低下がOct4プロモーター領域のヒストン修飾と相関することを見いだした。しかし、血管内皮細胞核に由来するntES細胞においては、特に血管内皮細胞への分化嗜好性を示すという傾向は見られず、核移植前の細胞特性の記憶がntES細胞において維持されている証拠は得られなかった。2.血管病のクローン治療モデル確立の予備実験として、血管新生やリモデリングに異常をきたすアドレノメデュリン(AM)遺伝子欠損マウス胚からのES細胞樹立を行い、分化特性を検討した。その性質は正常胚由来のES細胞と大きな差はなく、内皮細胞分化や血管網様構造の形成などについても有意な差は見られなかった。3.初期胚におけるエピジェネティック制御に関し、これまでメカニズムが明らかにされていなかった胚盤胞形成に至るまでの着床前胚でのDNA維持メチル化が、従来考えられていた細胞質に存在する卵細胞型DNAメチル化転移酵素(DNMTlo)よりも、むしろ周期的に核に出現する体細胞型アイソフォーム(DNMTls)によって制御されていることを明らかにした。iPS細胞の出現により、核移植によるクローン治療の価値は下がり、新しい体細胞リプログラミング研究が重要となった。これにより、本研究の今後の方向はリプログラミングの機序などの基盤研究へと展開するのが妥当と考えられた。

在这项研究中，通过源自血管细胞的克隆胚胎以及这些体细胞核源性ES细胞（NTES细胞）的不分化和分化特性建立ES细胞。此外，关于NTES细胞建立的机制，我们对早期胚胎的表观遗传调节进行了研究，重点是DNA维持甲基化机制。 1。通过使用细胞谱系的每个阶段，将小鼠ES细胞区分为血管内皮细胞作为供体细胞，我们发现，在分化的早期阶段，核转移后毛拉/胚泡的发生率降低，并且在核转移后与Ect4促销剂区域的核转移相关后的重编程敏感性下降。但是，没有倾向于表现出对NTES细胞中血管内皮细胞分化的偏爱，尤其是在NTES细胞中，也没有证据表明在NTES细胞中维持核转移之前的细胞性质记忆。 2。作为建立血管疾病克隆治疗模型的初步实验，是由缺乏肾上腺肾上腺素（AM）基因的小鼠胚胎建立的，该基因在血管生成和重塑中引起异常，并检查了分化特性。它的特性与从正常胚胎中得出的特性没有显着差异，并且在内皮细胞分化或血管网络结构的形成中没有发现显着差异。 3。关于早期胚胎中的表观遗传调节，我们揭示了植入前胚胎中的DNA维持甲基化导致胚泡形成的胚胎形成，以前尚不清楚，受体细胞类型同型（DNMTL）的调节，而不是在核细胞型DNA甲基化酶（DNA）中，而cy属甲基化酶（DNMTL）在dneyltlys cy syltlo（dnmtl）中显得定期出现。随着IPS细胞的出现，克隆治疗与核转移的价值已降低，新的体细胞重编程研究变得很重要。这使得将这项研究的未来方向发展为基础研究（例如重编程机制）是合理的。

项目成果

Recombinase-mediated cassette exchange revealed the selective use of Gq/G11-dependent and-independent endothelin-1/endothelin type-A receptor signaling in pharyngeal arch development.

重组酶介导的盒交换揭示了咽弓发育中 Gq/G11 依赖性和非依赖性内皮素-1/内皮素 A 型受体信号传导的选择性使用。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Development 135
• 作者: Sato;T.
• 通讯作者: T.

AMPK活性化とGSK3 β阻害が及ぼす糖新生抑制機構

AMPK 激活和 GSK3 β 抑制所发挥的糖异生抑制机制

• 发表时间: 2007
• 作者: Ono;H.;Nishiyama K;Yamamoto H;Amano T;淺井理恵子;内島泰信;枚田亨介;三谷明久;西山功一;栗原裕基;栗原由紀子;佐藤崇裕;礪波一夫;河村悠美子;堀家なな緒;堀家なな緒;西山功一;牧田亨介;山口泰弘;堀家なな緒
• 通讯作者: 堀家なな緒

AMPK活性化とGSK3β阻害か及ぼす糖新生抑制機構

AMPK 激活和 GSK3β 抑制所发挥的糖异生抑制机制

• 发表时间: 2007
• 作者: Ono;H.;Nishiyama K;Yamamoto H;Amano T;淺井理恵子;内島泰信;枚田亨介;三谷明久;西山功一;栗原裕基;栗原由紀子;佐藤崇裕;礪波一夫;河村悠美子;堀家なな緒
• 通讯作者: 堀家なな緒

Stimulation of sensory neurons by capsaicin increases tissue levels of IGF-I, thereby reducing reperfusion-induced apoptosis in mice.

辣椒素刺激感觉神经元会增加 IGF-I 的组织水平，从而减少小鼠再灌注诱导的细胞凋亡。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Neuropharmacology 52
• 作者: Harada;N.
• 通讯作者: N.

TAZ-deficient mice exhibit Multiple Cyst formation in developing kidney.

TAZ 缺陷小鼠在发育中的肾脏中表现出多个囊肿形成。

• 发表时间: 2007
• 作者: 西山功一;牧田亨介
• 通讯作者: 牧田亨介