安全性の高い次世代型食物アレルギー対策ワクチンの開発

开发高度安全的下一代食物过敏疫苗

• 批准号: 18658057
• 负责人: 田辺 創一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658057/
• 关键词: 乳酸菌; 抗アレルギー; 腸管細胞; タイトジャンクション; リポテイコ酸; Toll-like receptor 2

安全性の高い食物アレルギー対策ワクチンを作製することを目的として、今年度は引き続き、乳酸菌を経口ワクチンとして用いるための検討を行った。ヒト腸管細胞におよぼす乳酸菌の効果について、TNF-αで炎症を誘導したCaco-2細胞を用いて検討した。L.rhamnosusやE.hiraeなどの乳酸菌は、Caco-2細胞におけるIL-8などの炎症性サイトカインの発現を抑制し、タイトジャンクション(TJ)機能を強固にする作用のあることが明らかとなった。特に、TJを構成するZO-1発現を上昇させるとともに、TJをルーズにする方向に働くミオシン軽鎖キナーゼ(MLCK)の発現を低下させた。この作用は、乳酸菌をリパーゼ処理すると失われることから、活性には脂質関連の物質が関わっていることが示唆された。そこで、細胞壁構成成分であるリポテイコ酸(LTA)に着目した。E.hirae由来のLTAをアッセイしたところ、菌体同様、IL-8産生とMLCK発現の抑制、およびZO-1発現上昇効果が見られた。LTAの代わりに、Toll-like receptor 2(TLR2)に対する合成リガンドを用いても、同様であった。従って、乳酸菌の腸管バリア保護効果の少なくとも一部は、LTAなどの菌細胞壁成分が、腸管上皮に発現するTLR2を介して認識されることによってもたらされることが明らかとなった。得られた知見をもとに、今後、乳酸菌と食物抗原を混合したワクチンの作成を試みる。

今年，我们继续研究利用乳酸菌作为口服疫苗，目标是打造高度安全的食物过敏疫苗。使用 Caco-2 细胞研究乳酸菌对人肠细胞的影响，其中用 TNF-α 诱导炎症。研究表明，鼠李糖乳杆菌和伊氏大肠杆菌等乳酸菌可抑制 Caco-2 细胞中 IL-8 等炎症细胞因子的表达，并增强紧密连接 (TJ) 功能。特别是，它增加了构成 TJ 的 ZO-1 的表达，并减少了松弛 TJ 的肌球蛋白轻链激酶 (MLCK) 的表达。当乳酸菌用脂肪酶处理时，这种效应被消除，表明脂质相关物质参与了该活性。因此，我们重点关注细胞壁成分脂磷壁酸（LTA）。当对源自 E. hirae 的 LTA 进行检测时，发现它可以抑制 IL-8 的产生和 MLCK 的表达，并增加 ZO-1 的表达，与细菌细胞类似。当使用 Toll 样受体 2 (TLR2) 的合成配体代替 LTA 时，获得了类似的结果。因此，已经明确，乳酸菌的肠屏障保护作用的至少一部分是通过肠上皮中表达的TLR2识别LTA等细菌细胞壁成分而产生的。根据所获得的知识，我们将尝试研制一种混合乳酸菌和食物抗原的疫苗。

项目成果

Cell wall fraction of Enterococus hirae ameliorates TNF-α-induced barrier impairment in the human epithelial tight junction

海拉肠球菌的细胞壁部分可改善 TNF-α 诱导的人上皮紧密连接屏障损伤

• 发表时间: 2008
• 期刊: Lett. Appl. Microbiol. (印刷中)
• 作者: Hisamoto Y.;M.Kobayashi;久本洋子・小林幹夫;久本洋子・小林幹夫;Eiji Miyauchi
• 通讯作者: Eiji Miyauchi

Lactic acid bacterial lipoteichoic acid reverses TNF-α-induced barrier impairment in human epithelial tight junction

乳酸菌脂磷壁酸逆转 TNF-α 诱导的人上皮紧密连接屏障损伤

• 发表时间: 2007
• 作者: Morita;H.;他5名(5th name)
• 通讯作者: 他5名(5th name)

乳酸菌の腸管バリア保護効果

乳酸菌的肠道屏障保护作用

• 发表时间: 2007
• 作者: 渡辺純;田辺創一;Eiji Miyauchi;宮内栄治
• 通讯作者: 宮内栄治