ビオチン化プローブを用いた植物ホルモンABA受容体の同定と特性解析

使用生物素化探针鉴定和表征植物激素 ABA 受体

基本信息

批准号：
18657019
负责人：
朽津和幸
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Tokyo University of Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

ABA受容体の同定を目的とし,ビオチン化ABA(bio-ABA)を用いたファージディスプレイ法によるbio-ABA結合タンパク質の探索を試みた.まず,bio-ABAのシロイヌナズナにおける生理活性を,ABA誘導性遺伝子であるRAB18遺伝子の発現量を指標に調べたところ,ABAより低いながらもbio-ABAもRAB18遺伝子の発現を誘導できることを明らかにし,生理活性を持つことを確認した.bioABAは気孔閉鎖を誘導し、ABA様の生理作用を示すと共に、bioABAと蛍光標識アビジンを処理した孔辺細胞プロトプラストでは、細胞表層にbioABAの結合部位が観察された。bioABAを用いて,シロイヌナズナのcDNAライブラリーからスクリーニングをおこない,bio-ABA binding protein 1(BAB1)と名付けた候補遺伝子を含むいくつかの候補遺伝子を得た.予測アミノ酸配列から,BAB1はK-segmentと呼ばれるリジンリッチリピートを3つもつと考えられた.この領域は,α-helixを形成し,リガンドとの結合により構造変化がおこることが示唆されている.BAB1遺伝子にT-DNAが挿入されたbab1突然変異体を用いて,ABAによる発芽抑制と根の伸長抑制を調べたところ,いずれの表現型においてもbab1突然変異体は野生型よりもABAに対して高い感受性を示した.これらの結果は,BAB1がABAシグナルを負に制御するABA受容体として機能する可能性を示唆しており、今後の詳細な解析が期待される.

为了鉴定ABA受体，我们试图通过使用生物素化ABA（Bio-ABA）来搜索通过噬菌体显示的生物ABA结合蛋白。首先，我们使用ABA诱导基因RAB18基因的表达水平作为指数研究了Bio-ABA在拟南芥中的生理活性，并揭示了Bio-ABA可以诱导Rab18基因的表达，尽管低于ABA，并确认它具有生理活性。 Bioaba诱导了气孔闭合并表现出类似ABA的生理作用，并在用Bioaba处理的后卫细胞原生质体中，并在荧光标记为Avidin的抗生物素中，在细胞表面上观察到Bioaba的结合位点。 Bioaba用于从拟南芥cDNA文库中筛选Bio-Aba结合蛋白，我们获得了几个候选基因，包括名为1（BAB1）的候选基因。预测的氨基酸序列表明BAB1具有三个称为K段的赖氨酸富集。该区域形成α-螺旋，并在与配体结合时会导致结构变化。使用插入BAB1基因的T-DNA的BAB1突变体，我们研究了ABA在两种表型中对发芽和根部伸长的抑制作用，发现BAB1突变体对ABA比野生型更敏感。这些结果表明，BAB1可能充当负调节ABA信号的ABA受体，并预计进一步的详细分析。

项目成果

期刊论文数量（18）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

微生物の病原性と植物の防御応答

微生物致病性和植物防御反应

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Murata;Y.;向原隆文;向原隆文;向原隆文
通讯作者：
向原隆文

生体防御医学事典

生物防御医学百科全书

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Taiki Aoshi;et al.;丸山治彦
通讯作者：
丸山治彦

Spatiotemporal metabolic regulation of anthocyanin and its related compounds during development of marginal picotee petals in Petunia hybrids (Solanaceae).

矮牵牛（茄科）边缘皮科花瓣发育过程中花青素及其相关化合物的时空代谢调节。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
J. Plant Res. 120(印刷中)
影响因子：
0
作者：
Saito;R.;Kuchitsu;K.;Ozeki;Y.;Nakayama;M
通讯作者：
M

Synergistic Activation of Arabidipsis NADPH Oxidase AtrbohD by Ca^<2+> and Phosphorylation

Ca^2 和磷酸化协同激活拟南芥 NADPH 氧化酶 AtrbohD

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
J. Biol. Chem. 283
影响因子：
0
作者：
Ogasawara;Y.;Kaya;H.;Hiraoka;G.;Yumoto;F.;Kimura S.;Kadota Y.;Hishinuma;H.;Senzaki;E;Yamagoe;S.;Nagata;K.;Nara;M.;Suzuki;K.;Tanokura;M.;and Kuchitsu;K.
通讯作者：
K.

植物のストレス応答情報伝達におけるカルシウムイオンの役割とその動員の分子機構

钙离子在植物逆境响应信号中的作用及其动员的分子机制