Molecular analysis of the mechanism at neuromuscular junction by correlative light and cryo-electron microscopy

通过相关光和冷冻电子显微镜对神经肌肉接头机制进行分子分析

• 批准号: 23570196
• 负责人: MIYAZAWA Atsuo
• 金额: $ 3.41万
• 依托单位: University of Hyogo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23570196/
• 关键词: バイオイメージング; 神経筋接合部; クライオ電子顕微鏡; 相関顕微鏡法; アセチルコリン受容体; ニコチン性アセチルコリン受容体; クラスター; 分化; クライオ走査型電子顕微鏡; 共培養; C２C12細胞; クライオ走査型電子顕微鏡法; クライオ透過型電子顕微鏡法

A synapse between a motor neuron and a muscle fiber is called a neuromuscular junction. At the neuromuscular junction, the signal is transduced by acetylcholine molecules, which are released from the terminal of motor neurons and bind to acetylcholine receptors on the muscle fibers. The acetylcholine receptors form the clusters, interacting with various signaling and scaffolding proteins on the postsynaptic membrane of the muscle fibers. The acetylcholine receptor clusters are indispensable for neuromuscular signal transduction. But the molecular mechanism of acetylcholine receptor clustering remains to be investigated. In this study, we elucidated the molecular distribution of acetylcholine receptors and their associated proteins in the cluster, by the method of correlative observation between light microscopy and electron microscopy, especially, cryo-electron microscopy.

运动神经元和肌肉纤维之间的突触称为神经肌肉连接。在神经肌肉连接处，信号被乙酰胆碱分子转导，这些分子从运动神经元的末端释放，并与肌肉纤维上的乙酰胆碱受体结合。乙酰胆碱受体形成簇，与肌肉纤维突触后膜上的各种信号传导和脚手架蛋白相互作用。对于神经肌肉信号转导，乙酰胆碱受体簇是必不可少的。但是乙酰胆碱受体聚类的分子机制仍有待研究。在这项研究中，我们通过光学显微镜和电子显微镜之间的相关观察方法，尤其是冷冻电子显微镜，阐明了乙酰胆碱受体及其相关蛋白的分子分布。

项目成果

クライオ走査型電子顕微鏡を用いた生物試料の切削断面観察法

使用冷冻扫描电子显微镜观察生物样品的切割横截面

• 发表时间: 2012
• 作者: 西野有里;伊藤喜子;宮澤淳夫
• 通讯作者: 宮澤淳夫

Observation method of intact cellular architectures by cryo-scanning electron microscopy

冷冻扫描电子显微镜观察完整细胞结构的方法

• 发表时间: 2013
• 作者: Yuri Nishino;Yoshiko Ito;Atsuo Miyazawa.
• 通讯作者: Atsuo Miyazawa.

クライオSEMのための、凍結ミクロトームを用いた断面作製法とクライオトランスファー技法の紹介

介绍使用冷冻切片机和冷冻电镜冷冻转移技术的横截面制备方法

• 发表时间: 2012
• 作者: 伊藤喜子;西野有里;宮澤淳夫
• 通讯作者: 宮澤淳夫

Correlative Light-Electron Microscopy of Acetylcholine Receptor Clusters

乙酰胆碱受体簇的相关光电子显微镜

• 发表时间: 2011
• 作者: Yuri Nishino;Sho Hasegawa;Yusuke Kariya and Atsuo Miyazawa.
• 通讯作者: Yusuke Kariya and Atsuo Miyazawa.

In vitro formation of neuromuscular junction with NG108-15 cells and C2C12 myotubes

NG108-15细胞和C2C12肌管体外形成神经肌肉接头

• 发表时间: 2011
• 作者: Ayumi Ishihara;Junichi Saito;Yuko Fukunaga and Atsuo Miyazawa
• 通讯作者: Yuko Fukunaga and Atsuo Miyazawa