核小体移行型PTHrPトランスジェニックマウスにおける軟骨異常の解析

核仁定位 PTHrP 转基因小鼠软骨异常分析

基本信息

批准号：
17659577
负责人：
網塚憲生
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

平成18年度では、17年度で作製した核小体型PTHrP(副甲状腺ホルモン関連ペプチド)トランスジェニックマウス(Tgマウス)の組織解析を行った。胎生18日齢のTgマウスのgenotypingを挿入DNA特異的なprimerを用いて、核小体型PTHrP cDNAが過剰発現されているマウス個体を確認した。それらの大腿骨において、type II collagenを発現する骨端軟骨の静止層・増殖層では、PTHrPおよびmyc-tagは軟骨細胞の核および核小体に局在することが免疫組織学的に明らかにされた。このような、Tgマウス骨端軟骨を野生型マウスと比較すると、Tgマウスの静止層、増殖層、肥大化層の大きさは変わらず、骨端軟骨におけるPCNA陽性(増殖)軟骨細胞の比率、およびtype X collagen陽性肥大化層の領域も野生型マウスと比較しても違いが認められなかった。従って、核小体型PTHrPは、PTH/PTHrP受容体を介した作用とは異なり、軟骨細胞の分化増殖に著しい影響を及ぼさないと推測された。ところが、野生型マウスでは骨の長軸方向に平行な軟骨カラムが形成されるのに対して、Tgマウスの増殖層では、大きさおよび形状の異なる軟骨細胞が不規則に局在した。以前に報告したPTHrP欠損マウスでは軟骨細胞の形状や配列が不規則であったことを考え合わせると、軟骨細胞の形や配列性には核小体型PTHrPが関与する可能性が結論づけられた。本研究成果は平成18年度新潟歯学会第2回例会(平成18年11月)で報告するとともに論文作成中であり、平成19年度の日本骨形態計測学会、日本骨代謝学会にて発表予定(抄録提出済み)である。

在2006年，对2005年产生的核酸型PTHRP（甲状旁腺激素相关肽）的转基因小鼠（TG小鼠）进行了组织分析。使用DNA特异性引物插入从胚胎18天的TG小鼠中插入基因分型，以确认小鼠个体过表达的小鼠个体过表达的小鼠cdthna。在这些股骨中，在免疫组织化学上揭示了PTHRP和MYC-TAG位于表达II型胶原蛋白的外周期软骨的静息和增殖层中软骨细胞的细胞核和核仁。当比较TG小鼠与野生型小鼠的附生骨骼软骨时，静止的大小，TG小鼠的增殖和肥厚层的大小保持不变，并且在PCNA阳性（Propiferation）的PCNA - 阳性（增殖）小节中没有差异，并且在体外层中均与x毛的毛皮细胞相结合。野生型小鼠。因此，据推测，与PTH/PTHRP受体介导的作用不同，核仁PTHRP不会显着影响软骨细胞分化和增殖。然而，在野生型小鼠中，形成了与骨骼纵向轴平行的软骨柱，而在TG小鼠的增殖层中，不同尺寸和形状的软骨细胞是不规则的。考虑到先前报道的PTHRP缺陷小鼠的软骨细胞的不规则形状和比对，得出的结论是，核仁PTHRP可能与软骨细胞的形状和比对有关。这项研究的结果将在2006年Niigata牙科协会的第二次常规会议（2006年11月）上进行报道，目前正在准备，并将在2007年在日本骨形态计学会和日本骨骼代谢学会上介绍（摘要已提交）。