血液中における過眠症の生物学的指標の探索

寻找血液中嗜睡症的生物指标

• 批准号: 16659308
• 负责人: 本多 真
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659308/
• 关键词: 過眠症; ナルコレプシー; 遺伝子発現; 自己抗体; マイクロアレイ; 定量的RT-PCR法; 遺伝子

1.血液検体とデータベース作成について血液検体収集は順調に進行し、ナルコレプシー中核群250例、類縁の過眠症100例、対照群160例の血清、血漿を分離・保存し、DNAとRNA抽出cDNA作成を完了した。昨年度開発したデータベースへの臨床検査所見の入力も8割程度完了し、2.の予備的解析に利用する体制ができた。2.網羅的遺伝子発現解析によって選択された疾患関連遺伝子の発現検討死後脳視床下部組織を用いたマイクロアレイ解析と定量的RT-PCR法により同定された、合計17個の過眠症関連遺伝子について血中での発現検討を行い、8遺伝子が安定して白血球中で定量可能であることを見出した。上記のデータベースを用いた予備的解析(疾患群・対照群各10例)を行い、このうち5遺伝子は過眠症診断や疾患重症度と相関を示す知見が得られた。条件が揃った(未服薬)検体数の収集を継続し、生物学的指標として確立できるものがあるか、今後検討数を増やして確認をすすめる。なお昨年度確立した高感度自己抗体検出法を、いくつかの新規疾患関連遺伝子に対して行ったが、疾患特異性を示す遺伝子は見出せなかった。3.白血球中の遺伝子発現比較による新規疾患関連遺伝子の同定血液中のmRNAをプールして疾患群特異的な発現変化を示す遺伝子をdifferential display法で探索した。2次スクリーニング後、MX2という免疫関連遺伝子がナルコレプシー群で有意な発現低下を示すことが確認され、新規の生物学的指標となることを見出した。現在印刷中である。

1、关于血样及数据库建立 血样采集进展顺利，对250例发作性睡病核心组、100例相关嗜睡症、160例对照组的血清和血浆进行分离保存，并提取DNA和RNA并进行分析。 cDNA 已完成创建。大约80%的临床试验结果已输入去年开发的数据库，并已建立一个系统用于2中所述的初步分析。 2.检查通过综合基因表达分析选择的疾病相关基因的表达我们研究了8个基因在白细胞中的表达，发现8个基因可以在白细胞中稳定定量。使用上述数据库进行初步分析（疾病组和对照组各10名患者），结果显示5个基因与嗜睡诊断和疾病严重程度之间存在相关性。未来我们将继续采集符合条件（不服用药物）的样本，并增加样本数量，以确认是否有可以建立作为生物指标的样本。去年建立的高灵敏度自身抗体检测方法应用于多个新的疾病相关基因，但没有发现表现出疾病特异性的基因。 3.通过比较白细胞中的基因表达来鉴定新的疾病相关基因我们汇集了血液mRNA并使用差异显示来寻找显示疾病组特异性表达变化的基因。经过二次筛选，证实一种名为MX2的免疫相关基因的表达在发作性睡病组中显着降低，并发现它可以作为新的生物学指标。目前正在印刷中。