脂肪萎縮性糖尿病の脂肪細胞治療

脂肪细胞治疗脂肪萎缩性糖尿病

基本信息

批准号：
16659247
负责人：
中尾一和
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(背景)脂肪組織は生体最大の内分泌臓器である。脂肪萎縮性糖尿病は脂肪組織欠如による著明なインスリン抵抗性を伴う難治性糖尿病であるが、我々は、ヒト脂肪萎縮性糖尿病のレプチン補充療法の劇的な改善効果を既に証明している。脂肪萎縮性糖尿病は脂肪細胞の欠如が根本的原因であること、多種類のアディポサイトカインが分泌されることから、脂肪細胞治療の開発の意義は大きい。歯髄組織で脂肪細胞へ分化する幹細胞の存在の可能性が指摘されており、歯髄からex vivoの培養系で大量に脂肪細胞を得られれば、生体に侵襲を与えない点で画期的である。(方法結果)京都大学倫理委員会の承認の下に、抜歯された成人智歯、脱落した小児乳歯から歯髄を採取し、コラゲナーゼなどでdigestionし、2週間培養し、脂肪細胞への分化誘導を検討した。歯髄細胞のvalidityを検討するために骨芽細胞への分化も検討した。(結果)智歯歯髄細胞、乳歯歯髄細胞でBMP-2などによる分化誘導刺激によりALP activityが上昇し、骨芽細胞への分化誘導が確認された。智歯歯髄細胞、乳歯歯髄細胞、及びpositive controlとしてヒト骨髄由来幹細胞で、adipogenic induction mediumで成熟脂肪細胞への分化誘導刺激を行った。骨髄由来幹細胞では分化誘導刺激によりOil red O染色で脂質の蓄積、培養上清中のレプチン様免疫活性より、成熟脂肪細胞への分化を認めたが、智歯歯髄細胞、乳歯歯髄細胞では成熟脂肪細胞への分化を認めなかった。(結論)智歯歯髄細胞、乳歯歯髄細胞には、骨芽細胞へ分化する細胞が含まれているが、脂肪細胞へ分化する細胞は認められなかった。歯髄における脂肪細胞へ分化する細胞の存在を完全に否定するのは難しいが、たとえ存在しても、その割合は低いものであり、脂肪細胞を高い効率で得る系として歯髄細胞が適切ではないことが示された。

（背景）脂肪组织是生物体中最大的内分泌器官。脂肪萎缩性糖尿病是一种难治性糖尿病，由于缺乏脂肪组织而伴有明显的胰岛素抵抗，我们已经证明了瘦素替代疗法对人类脂肪萎缩性糖尿病有显着的改善作用。脂肪萎缩性糖尿病的根本原因是脂肪细胞缺乏，并且分泌多种类型的脂肪细胞因子，因此发展脂肪细胞治疗具有重要意义。已经指出牙髓组织中存在分化为脂肪细胞的干细胞的可能性，如果能够在离体培养系统中从牙髓中获得大量脂肪细胞，这将是革命性的对生命体造成任何侵袭。 (方法结果) 经京都大学伦理委员会批准，从拔出的成人智齿和脱落的儿童乳牙中采集牙髓，用胶原酶等消化，培养2周，并检查向脂肪细胞的诱导分化。。为了检查牙髓细胞的有效性，我们还检查了它们向成骨细胞的分化。 (结果)由于BMP-2等的分化诱导刺激，智齿牙髓细胞和乳牙牙髓细胞中的ALP活性增加，并且确认了向成骨细胞的分化诱导。使用脂肪形成诱导培养基进行刺激以诱导分化成成熟脂肪细胞，并使用智齿牙髓细胞、乳牙牙髓细胞和人骨髓来源的干细胞作为阳性对照。在骨髓来源的干细胞中，由于分化诱导刺激，通过油红O染色和培养上清液中的瘦素样免疫活性导致脂质积累，证实分化为成熟脂肪细胞，但在智齿牙髓细胞和乳牙牙髓细胞中，未观察到成熟脂肪细胞的分化。 (结论)智齿和乳牙的牙髓细胞含有分化为成骨细胞的细胞，但未观察到分化为脂肪细胞的细胞。尽管很难完全否认牙髓中分化为脂肪细胞的细胞的存在，但即使存在，其比例也很低，并且表明牙髓细胞不适合作为高效获得脂肪细胞的系统。