マスト細胞の基底膜への接着は細胞の増殖、機能の制御に関わるか?

肥大细胞与基底膜的粘附是否参与控制细胞增殖和功能？

基本信息

批准号：
16659024
负责人：
市川厚
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Mukogawa Women's University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659024/
关键词：
マスト細胞マトリックス細胞接着 PGE2 Epac-Rap1 ヒスタミン IL-6 mastocytoma P-815

项目摘要

本研究の目的はマスト細胞が結合組織基底膜に接着している現象の生理的役割の解明のために、細胞接着と細胞増殖、分化、機能発現の相関を明らかにすることである。研究実施計画に基づき実験を行い,以下の研究成果を得た。1.マスト細胞の基底膜成分への接着と細胞の増殖・分化に関する研究増殖性マスト細胞株として、癌化マスト細胞(mastocytoma P-815 cells ; P-815)とマウス血液幹細胞由来培養マスト細胞(bone marrow-derived mast cells ; BMMC)を調製し、in vitro細胞培養系で約10^7個細胞をPGE2/EP4選択性アゴニストあるいは8-Br-cAMPで18時間処置すると,約20-40%の細胞がシャーレ壁に吸着させた細胞外マトリックス成分(フィブロネクチン>ラミニン>コラーゲンに接着した。非接着細胞に比して.接着細胞は大部分がG1期細胞で、その接着細胞はEDTA等で遊離細胞とするとS期細胞が増加し、増殖する。PGE2添加による細胞接着シグナルは、接着開始初期シグナルはPKA依存性反応であるが、接着を維持するシグナルはPKA非依存性のEpac-Rap1シグナルで、Ca2+/CaMに依存する反応が起きている。2.マスト細胞の基底膜成分への接着とヒスタミン、サイトカイン等の発現制御に関する研究PGE2刺激による接着マスト細胞は非接着細胞に比して増殖能は低下しているが、細胞機能は活性化していることがわかった。接着細胞のhistidine decarboxylase, IL-6, MCP9の発現とタンパクは増加していた。マウス背部皮下に空気嚢を作製し、空気嚢に注入したP-815細胞の結合組織基底膜への移行は,PGE2/EP4受容体依存性に起こることがわかった。これらの事実からマスト細胞は基底膜と相互作用することにより増殖、機能発現が調節されることが判明した。

本研究的目的是阐明细胞粘附、细胞增殖、分化和功能表达之间的相关性，以阐明肥大细胞粘附结缔组织基底膜的生理作用。根据研究实施方案进行了实验，取得了以下研究成果。 1. 肥大细胞与基底膜成分的粘附和细胞增殖/分化的研究作为增殖性肥大细胞系、癌性肥大细胞（肥大细胞瘤P-815细胞；P-815）和小鼠血液干细胞来源的培养肥大细胞（制备骨）骨髓来源的肥大细胞 (BMMC) 和当在体外细胞培养系统中用 PGE2/EP4 选择性激动剂或 8-Br-cAMP 处理大约 10^7 个细胞 18 小时时，大约 20-40% 的细胞被吸收到细胞外基质成分（纤维状基质）中。与非贴壁细胞相比，贴壁细胞大多是G1期细胞，当这些贴壁细胞用EDTA游离时，S期细胞通过添加而增加并增殖。启动粘附的初始信号是PKA依赖性反应，但维持粘附的信号是PKA独立的Epac-Rap1信号，并且发生Ca2+/CaM依赖性反应。2．粘附及组胺、细胞因子等表达调控的研究。虽然由于PGE2刺激，贴壁肥大细胞的增殖能力低于非贴壁细胞，但发现贴壁细胞的细胞功能被激活。在小鼠背部皮下制造了脱羧酶、IL-6 和 MCP9 的表达和蛋白质水平，并且注射到气囊中的 P-815 细胞迁移到结缔组织基底膜。肥大细胞增殖和功能表达通过与基底膜的相互作用来调节。