レチノイドによる中枢性甲状腺機能低下症の病態生理の解明

阐明类维生素A引起的中枢性甲状腺功能减退症的病理生理学

基本信息

批准号：
12770616
负责人：
佐藤哲郎
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770616/
关键词：
レチノイド TSH TRH 甲状腺ホルモン中枢性甲状腺機能低下症 RAR mRNA 転写

项目摘要

皮膚T細胞リンパ腫治療目的に投与されたretinoid X'receptor(RXR)選択的リガンドが、下垂体TSHの合成をTSHβsubunit遺伝子promoter領域に存在すると予測されるnegative regulatory elementを介して転写レベルで抑制することにより二次性甲状腺機能低下症を引き起こすことが報告された。しかし、レチノイドが視床下部TSH放出ホルモン(thyrotropin-releasing hormone ; TRH)の合成、分泌に影響を及ぼすか否か不明であり、生体内でLGD346がTSHβ遺伝子に対する作用のみならず視床下部TRH遺伝子の発現を直接抑制することによって三次性甲状腺機能低下症をきたす可能性も考えられる。本研究では、まずall-trans-retinoic acid(atRA)ならびに9-cis-RAの視床下部TRH合成に及ぼす影響を検討した。8週齢雄マウスに100 μg/kgのall-trans-RAないしは9-cis-RAを14日間腹腔内投与後、血中TSHならびtotal T4レベルをRIA法で測定し、下垂体TSHβ mRNAならびに前視床下部TRH mRNAをNorthern blot法にて解析した。陽性コントロール群として100 μg/kgのtri-iodothyronine(T3)を3日間投与した群について同様に解析した。その結果、atRA群において、有意なTSHならびにT4値の低下を認めた。更に、同群において下垂体TSH mRNAならびに前視床下部TRH mRNAレベルにも有意な減少が認められた。9-cis-RA群においても同様に減少傾向を認めたが、有意差を認めなかった。一方、atRA群のTSH、T4の減少はT3群に比較して弱かった。次に、ヒトTRH遺伝子promoterをluciferase reporterに接続したplasmidをリン酸カルシウム法にてCV-1細胞に遺伝子導入し、そのpromoter活性に及ぼすatRAの影響をRAR発現ベクターをcotransfectionして検討した。-900/+51, -500/+51, -170/+51の3種類のTRH promoter constructにおいてRARのcotransfectionにより、promoter活性が刺激され、100μM atRA添加によりpromoter活性が抑制された。RXRのcotransfectionはpromoter活性を増強したが、9-cis-RAによる抑制効果を認めなかった。また、RARα, β, γによる抑制機能の違いは認められなかった。以上の結果よりatRAは、下垂体TSHに加えて、視床下部TRHの発現も転写レベルで抑制することが示唆され、その抑制効果はT3に比較して明らかに弱いことが判明した。

肤色T -Cell淋巴瘤预测选择性配体在TSHβSubunit基因启动子区域处于转移水平。然而，尚不清楚类视黄素是否会影响下丘脑TSH释放激素的合成和分泌（甲状腺蛋白释放激素； TRH），而活体中的LGD346不仅对TSHβ基因的影响，而且是对TSHβ基因的影响出血基因。在这项研究中，我们首先检查了对全反式反激酸（ATRA）和9-CIS-RA下丘脑TRH合成的影响。 100μg/kg的雄性小鼠的全反射RA或9-CIS-RA 8周，持续14天，通过RIA方法测量血液TSH和总T4水平，而AugurationTSHβmRNA和前部测量是正面。将100μg/kg的100μg/kg（T3）（T3）组为三天，分析为阳性对照组。结果，发现ATRA组的TSH和T4值显着下降。此外，在同一组的同一诊所TRH mRNA水平TRH mRNA水平中发现了显着降低。在9-CIS-RA组中，还认识到减少的趋势，但没有显着差异。另一方面，ATRA组中TSH和T4的减少比T3组弱。接下来，荧光素酶是人类TRH基因的钙，对启动子活性的ATRA效应是RAR表达载体。 RAR的RAR在三种类型的TRH启动子结构结构中刺激了RAR的共转染：-900/+51，-500/+51，-170/+51，通过添加100μMATRA抑制启动子活性。 RXR的共转染增强了启动子活性，但尚未识别出9-CIS-RA抑制作用。另外，未观察到由于RARα，β和γ引起的抑制功能的差异。从上述结果中，ATRA被提出，除了垂体TSH外，ATRA在转录水平上也被抑制，并且抑制作用显然比T3弱。