唾液腺における末梢型ベンゾジアゼピン受容体の薬理学的・分子生物学的特徴の検索

寻找唾液腺外周苯二氮卓受体的药理学和分子生物学特征

• 批准号: 11771147
• 负责人: 山岸 久子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771147/
• 关键词: 唾液腺; 末梢型ベンゾジアゼピン受容体; RT-PCR; in situ RT-PCR; GFPベクター; [^3H]PK14105; photoaffinity labeling; 18 kDa protein

唾液腺における末梢型ベンゾジアゼピン受容体の薬理学的、分子生物学的特徴について以下の知見が得られた。1.RT-PCRによる末梢型ベンゾジアゼピン受容体mRNAの検出:ラットの耳下腺、顎下腺、舌下腺からtotal RNAを調製した。さらにこれからmRNAを調製した。ラットの末梢型ベンゾジアゼピン受容体の塩基配列から、特異的なプライマーをデザインした。この末梢型ベンゾジアゼピン受容体の特異的プライマーを用いてcDNAを増幅し、RT-PCRを行い、電気泳動した結果、ラットの耳下腺、顎下腺および舌下腺に特異的なバンドが検出された。2.1で使用したプライマーを用いて、スライドグラス上の組織(耳下腺、顎下腺、舌下腺)に対して、in situ RT-PCRを行った結果、腺房細胞および導管部に特異的な染色が認められ、末梢型ベンゾジアゼピン受容体のmRNAが検出された。3.Green fluorescent protein(GFP)ベクターと末梢型ベンゾジアゼピン受容体cDNAを組み合わせて、融合タンパク産生ベクターを作製した。作製したベクターを唾液腺培養細胞にトランスフェクションした。現在、細胞内における末梢型ベンゾジアゼピン受容体の局在の検索を蛍光顕微鏡を用いて行っている。以上の結果から、末梢型ベンゾジアゼピン受容体mRNAは、ラットの耳下腺、顎下腺および舌下腺の腺房細胞および導管部に存在することが明らかになった。

关于唾液腺中周围苯二氮卓受体的药理和分子生物学特征获得了以下知识。 1。通过RT-PCR检测外周苯并二氮卓受体mRNA：大鼠腮腺，稻田和总RNA。另外，制备mRNA。特异性底漆是根据大鼠外周二氮卓受体的基础序列设计的。 cDNA被放大，进行RT-PCR，并使用外围苯并二氮杂受体的特殊底漆在腮腺，Uden和细分腺体中检测到电气游泳。由于使用2.1中使用的引物，它是针对腺体细胞和导管的特异性的，并且检测到外周二氮卓受体mRNA。 3。绿色荧光蛋白（GFP）通过将载体载体和外周苯二氮卓受体受体cDNA结合而产生融合蛋白产生的载体。生产的载体转染到唾液教育细胞中。当前，使用荧光显微镜对细胞中周围苯二氮卓受体进行局部搜索。上述结果表明，大鼠腮腺，下巴和语言腺体中存在周围苯二氮卓受体mRNA和传导管道。

项目成果

Yamagishi H: "Pharmacological Characterization of an 18KDa Protein Associated with the Peripheral-Type Benzodiazepine Receptors in Salivary Glands"The Japanese Journal of Pharmacology. 82(2). 110-115 (2000)

Yamagishi H：“与唾液腺外周型苯二氮卓受体相关的 18KDa 蛋白质的药理学特征”《日本药理学杂志》。