シグナル伝達系からみた癌細胞放射線抵抗性獲得機序の解明と放射線治療法選択への応用

从信号转导系统角度阐明癌细胞获得放射抗性的机制及其在放疗方法选择中的应用

• 批准号: 11770494
• 负责人: 宇野 隆
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770494/
• 关键词: 放射線感受性; ras遺伝子; 細胞周期; アポトーシス; 培養細胞; 細胞増殖速度

本研究は放射線抵抗性を獲得した細胞を、細胞周期への影響とシグナル伝達系の両面から解析し、これらの因子が放射線抵抗性へ及ぼす影響を解明することを目的とした。この目的を達成するため、昨年度は同一細胞から放射線感受性の高い細胞と、放射線抵抗性の細胞の確立を試みた。しかし、放射線感受性が違う細胞株を分離しても、継代培養を繰り返す経過中、再び感受性が同等に変化して、明らかに感受性の異なる細胞株の樹立は困難であった。そのため、放射線感受性の異なる異種の培養細胞を用いて、培養中の細胞増殖速度とcell cycleの変化を、フローサイトメトリーで経時的に解析した。しかし、細胞の放射線感受性とG1/G2+M期の比率の間に、明らかな関連を見いだすことは出来なかった。本年度は発想を転換した。ヒト線維芽細胞にv-Ha-rasを遺伝子導入し、rasに関連するシグナル伝達系の発現を過剰発現させた細胞を入手した。この細胞はアポトーシスを過剰発現することが知られていた。この遺伝子を過剰発現した細胞と、親細胞の放射線感受性を比較検討した。その結果、遺伝子を過剰発現した細胞は、放射線感受性が親細胞より極めて高くなっていた。放射線感受性が高くなった機序として、遺伝子過剰発現細胞では活性化したERK量の減少が認められるが、PDGFを添加するとERK量が回復することから、燐酸化したERKとAKtが抑制されることが細胞死を高くしていると考えられた。

这项研究的目的是分析从对细胞周期和信号传输系统的影响中获得辐射抗性的细胞，并阐明这些因素对辐射抗性的影响。为了实现此目的，我们试图建立一个具有辐射抗性的相同细胞和细胞较高辐射的细胞。但是，即使在辐射敏感性不同的细胞库存分离期间，在反复替代培养过程中，灵敏度再次改变，因此很难建立具有明显不同敏感性的细胞库存。因此，使用具有不同辐射敏感性的不同类型的培养细胞，在流动部位计量表中分析了培养过程中的细胞增殖速度和细胞周期的变化。但是，无法找到细胞辐射敏感性与G1/G2+M周期之间的明显关系。我今年改变了想法。 V-HA-RAS是在人的成纤维细胞中引入的，并获得了与RAS相关的信号传输系统表达的细胞。已知细胞过度凋亡。我们比较了过表达的基因的辐射灵敏度和细胞的辐射灵敏度。结果，定价过高的基因的辐射敏感性比亲本细胞具有极高的辐射敏感性。高辐射灵敏度的机制已在遗传上的ERK量中降低，但是当添加PDGF时，由于恢复了ERK的量，因此抑制了ERK和AKT的量。很高。