四肢の発生におけるWntシグナルの働きの解析

Wnt信号在肢体发育中的作用分析

基本信息

批准号：
10780465
负责人：
川上泰彦
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kawasaki Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780465/
关键词：
Wnt シグナル分子四肢発生器官形成

项目摘要

分泌タンパク質Wntファミリーは様々な器官形成の過程で発現し,重要な働きをしていると考えられているが,その働きについては十分理解されていない。そこで,本研究ではニワトリ四肢の発生系を用いて,Wntファミリーの働きの解析を行った。ニワトリ四肢で発現するWntファミリーの因子を同定し,その発現パターンを調べた。Wnt-3aが頂堤で,Wnt-4が関節形成領域で,Wnt-5aが頂堤と遠位の間充織で,Wnt-7aが背側外胚葉で,Wnt-11が背側と腹側の上皮に近接する間充織で,各々固有のパターンで発現していることを見出した。胚操作後の発現パターンを解析し,背側上皮からのシグナルがWnt-11の発現に必要であり,頂堤からのシグナルがWnt-5aの遠位間充織での発現に必要であることを明かにした。この結果から,Wntファミリーの因子は,上皮からのシグナルによって異なる発現調節を受けることが示された。また,遠位で発現するWnt-5aをレトロウイルスベクターを用いて肢芽全体で発現させると,主に軛脚部の軟骨分化が遅延した。この結果から,Wnt-5aは軟骨分化の調節を行うことで,近遠軸に沿ったパターン形成に関わることが示された。次いでWntシグナルの受容機構について解析するため,受容体をコードするFrizzledファミリーの遺伝子クローニングを行い,6種類のFrizzled遺伝子を得た。これらのFrizzledファミリーは,Wntファミリーと同じく肢芽において固有の発現パターンを示した。このうち新奇Frizzledとして同定したFrizzled-10は,Wnt-7a8の受容体として肢芽後部間充織でのSonic Hedgehogの発現維持に働くことを明かにした。

分泌蛋白Wnt家族被认为是在各种器官的过程中表达的，但该功能尚未完全理解。因此，在这项研究中，我们使用鸡肉肢的出现分析了Wnt家族的功能。确定了在鸡肉肢中表达的Wnt家族的因子，并检查了表达模式。 Wnt-3a是顶部路堤，Wnt-4是关节构成区域，Wnt-5a是sarthe和遥远的边缘，Wnt-7a是背面实施方案的背面，Wnt-11是背侧和腹部的侧面。分析胚胎操作后的表达模式，对于Wnt-11的表达是必需的，而Wnt-5A的远处和篡改是必需的。结果，结果表明，Wnt家族的因子与上皮的信号不同。另外，当使用逆转录病毒载体在整个肢体芽中表达的Wnt-5a在远处表达时，腿的软骨分化主要延迟。从此结果，可以表明Wnt-5a通过调节软骨分化而参与了沿近距离轴的模式形成。然后，为了分析Wnt信号的受体，进行了卷曲的家族克隆以编码受体，并获得了六种类型的卷曲基因。这些卷曲的家庭像Wnt家族一样，在肢体芽中具有独特的表达方式。其中，被确定为新的毛躁的毛躁-10透露，它将在芽后将Sonic刺猬表达为Wnt-7A8受体。