IgGの糖鎖が胎児の免疫能と胎盤通過性に果たす役割に関する研究

IgG糖链在胎儿免疫功能及胎盘转运中作用的研究

• 批准号: 09772071
• 负责人: 木村 聡
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09772071/
• 关键词: IgG; 臍帯血; 糖鎖; 新生児; 妊婦; IgG; 臍帯血; 糖鎖; 新生児; 妊婦

血清IgGのFc部分にはアスパラギン結合型の糖鎖が付着しており、3次構造の維持に関与している。我々はFMOC(fluoromethylchroloformate)を標識物質とした糖鎖分析法を開発し、昨年度は臍帯血IgGの糖鎖が成人と異なる事を報告した。一方、血清IgGには胎盤通過性があるため、糖鎖の違いが胎盤通過性に影響を及ぼす可能性が考えられる。そこで今年度は臍帯血と妊婦血清のIgGを精製し、両者の糖鎖組成を比較した。同意に基づき25例、12組の妊婦より血液、および臍帯血を採取した。臍帯血は分娩直後、母体血は分娩の前後24時間以内に採取されたものを使用した。プロテインAセファロースで血清からIgGを精製、シアリダーゼ処理の後、N-glycanaseにて糖鎖を遊離したのちFMOCを標識し、HPLC法にて分離、定量を行った。その結果、非還元末端にガラクトースをもたない糖鎖(G0)の全糖鎖中に占める割合は、臍帯血で7.88±3.6%、母体血9.75±5.3%と、臍帯血で有意に低かった(p=0.039)。血清IgG量との積からG0をもつIgGの濃度を算出すると、両者の差は拡大した(p=0.008)。一方、2つのガラクトースをもつ糖鎖(G2)の全糖鎖中に占める割合は、母児間で有意差が認められず、量的には母児間でG0よりも強い相関が得られた。G2の割合および絶対量では母児間に有意差を認めず、高い胎盤通過性を反映した結果となったが、G0の割合は妊婦で有意に高く、絶対量でみるとさらに差は明確であった。この差が生じた理由は、G0の胎盤通過性がG2よりも低いためと推定される。しかし児側で産生されるIgGにG0の割合が低いか、G0の半減期が児では短いという可能性も残され、現在検討中である。いずれにしても本研究、は胎児と母体のIgG糖鎖構造の比較を行った、世界で初めての報告となる。

血清IgG的FC部分附着在白天连接的糖链上，该糖链涉及维持三级结构。我们使用FMOC（荧光甲基酚酯）作为标记物质开发了一种糖基化方法，去年我们报告说，脐带血IgG的糖基化与成年人的糖基化不同。另一方面，由于血清IgG具有胎盘透射率，因此糖链的差异可能会影响胎盘透射率。因此，今年我们从脐带血和孕妇的血清中纯化IgG，并比较了两者的糖链组成。根据同意，从25例患者和12名孕妇收集血液和脐带血。分娩后立即采取脐带血，并在分娩前和后24小时内采取孕产妇血液。用蛋白质A sepharose从血清中纯化IgG，用唾液酸酶处理，然后用N-甘氨酸酶释放糖链，然后用FMOC标记，通过HPLC分离和定量。结果，在总基质中不含有半乳糖的聚糖（G0）的比例为脐带血的7.88±3.6％，产妇血液为9.75±5.3％，这显着降低（P = 0.039）。当从血清IgG量的乘积计算出G0的IgG浓度时，两者之间的差异增加（p = 0.008）。另一方面，母子和儿童之间没有观察到显着差异，并且在母子之间，在母链中，两种半乳糖（G2）的糖的比例比G0之间更强的相关性。母亲和儿童在G2的比例和绝对数量的比例之间没有显着差异，反映了胎盘的高可质性，但是孕妇G0的比例明显更高，当以绝对数量的观察时，差异甚至更明显。据估计，这种差异是由于G0的胎盘透射率较低。但是，儿童产生的IgG中G0的比例很低，或者G0的半衰期在儿童中很短，目前正在调查中。无论如何，这项研究是世界上第一个比较胎儿和母体的IgG聚糖结构的研究。