シロウオの卵巣卵の成熟過程と成熟を誘導する要因の解明

阐明白鲑卵巢卵的成熟过程及诱导成熟的因素

基本信息

批准号：
09760182
负责人：
秋山信彦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tokai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760182/
关键词：
シロウオ卵成熟ステロイドホルモン卵成熟誘導要因

项目摘要

本研究では,シロウオの卵巣卵の成熟過程と,成熟誘導要因の解明を目的とした.1997年4月に孵化した仔魚を海水中で飼育し,定期的に卵巣卵を組織学的に観察した.1998年1月まで飼育魚の卵巣卵は周辺仁期であり,卵黄の蓄積は見られなかった.2月になると卵黄蓄積が開始されたが,本種の場合,卵黄球は直ちに融合し,植物極側で卵黄塊を形成し始めた.ブアン固定・H・E染色で非染色の小顆粒が多数観察され,このうちのいくつかは,Allen液固定・PAS陽性を示したことから表層胞と考えられた.この段階は通常の魚類では表層胞期(卵黄胞期)にあたるが,本種では核がすでに移動を開始していることから表層胞期と卵黄球期が欠落し,核移動期となると考えられた.この状態は4月まで続くが,4月には核が著しく扁平し,卵黄塊は卵巣卵のほぼ全域を占め,卵表面でのみ卵黄球が確認できた.次に1997年および1998年4〜5月に遡上したシロウオに営巣させ,定期的に巣内から営巣個体を抽出し,卵巣卵を摘出後24時間培養し,培養液中に分泌されたステロイドホルモンを酵素免疫測定法で測定した.営巣前から産卵直前まで卵巣卵は核移動期であるが,卵径は増大し,含水率は一定であった.営巣前に抽出した10個体のGSIは0.16〜0.25であり,1卵巣から24時間に分泌されたestradiol-17β(以下e2)は31.3〜354.5ngであったが,17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one(以下diOH-p)は検出されなかった.営巣開始から5日目に抽出した10個体ではGSIが0.43〜0.82と高く,分泌されたe2は16.9〜623.5ng/卵巣/dayであり,その内2個体ではdiOH-pを1.1,1.5ng/卵巣/day分泌していた.10日目と12日目では産卵個体が認められ,GSIは0.71〜1.68と高かった.10日目では10個体中7個体でd1OH-pを2.8〜13.2ng/卵巣/day分泌した.12日目では10個体全てでdiOH-pが3.4〜32.9ng/卵巣/day分泌していた.e2は10日以後でも33.9〜404.4ng/卵巣/day分泌しており,本種では卵黄蓄積が産卵直前まで進行し,diOH-pが最終成熟を誘起すると考えられた.

本研究的目的是阐明白鲑卵巢卵的成熟过程以及诱导成熟的因素。1997年4月孵化的幼体在海水中饲养，定期对卵巢卵进行组织学观察，直到1998年1月，对白鲑卵的卵巢卵进行了组织学观察。饲养鱼处于末梢期，未观察到卵黄堆积。然而，在该物种中，卵黄球立即融合，并开始在植物极一侧形成卵黄团。通过 Bouin 固定和 H/E 染色观察到许多未染色的小颗粒，其中一些被认为是表面细胞，因为它们。用 Allen 溶液固定并显示 PAS 阳性。在正常鱼类中，该阶段对应于浅层卵泡阶段（卵黄卵泡阶段），但在该物种中，细胞核已经开始迁移，因此缺少浅层卵泡阶段和卵黄阶段，并且认为该阶段这种情况一直持续到四月份，此时细胞核明显变平，卵黄团几乎占据了卵巢卵子的整个区域，卵子表面也变平了。仅在表面确认有卵黄球。接下来，在1997年4月、5月和1998年，我们让向上游洄游的白鱼筑巢，并定期从巢中取出筑巢个体，取出卵巢卵并培养24小时。通过酶免疫测定法测量分泌到培养基中的类固醇激素。筑巢前，卵巢卵处于核迁移期，但卵直径增大，含水量保持恒定，雌二醇-17β（以下简称e2）为31.3～354.5ng，但17α。 ,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮(以下简称diOH-p)未检出。筑巢后第5天提取的10只个体中GSI较高,为0.43~0.82,分泌的e2为16.9~ 623.5ng/卵巢/天，其中第 10 天和第 12 天，有 2 只个体分泌了 1.1 ng 和 1.5 ng/卵巢/天的 diOH-p，第 10 天，有 7 只个体的 GSI 高达 0.71 至 1.68。分泌 2.8 至 13.2 ng/卵巢/天的 d1OH-p.1第2天，所有10个个体的diOH-p分泌量为3.4至32.9ng/卵巢/天，即使在第10天之后，E2的分泌量也为33.9至404.4ng/卵巢/天，表明没有观察到蛋黄积累。人们认为 diOH-p 会诱导该物种的最终成熟，直至产卵前。