脳虚血モデルにおける海馬単一神経細胞内イオン濃度変動の光学的測定

脑缺血模型中单个海马神经元内离子浓度波动的光学测量

基本信息

批准号：
08780793
负责人：
中村健
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、海馬スライスin vitro脳虚血モデルにおいて虚血負荷をかけた場合に海馬CA1ニューロンで生じる細胞内カルシウム及びナトリウム濃度上昇を単一神経細胞レベルでとらえた。1.細胞内カルシウム濃度測定に関して以下の成果が得られた。単一神経細胞内での測定のための基礎的検討として、従来の方法により以下のことを行った。(1)組織染色法やCA1ニューロン欠損標本を用いてマクロイメージング法によるCA1領域でのCa上昇が、神経細胞内に由来することを明らかにした。(2)親和性の異なる複数のカルシウム指示薬によりCA1ニューロンの樹状突起における特異的上昇を明確化した。この結果をふまえて海馬単一神経細胞内へCa指示薬を注入し、虚血刺激中に生じる細胞内カルシウム濃度変動の測定を行った。その結果、以下のことが明らかとなった。(3)虚血負荷により、数分の潜時を以って海馬CA1ニューロンで細胞内カルシウム濃度が上昇した。(4)細胞体だけでなく樹状突起部でも上昇した。2.細胞内ナトリウム濃度変動に関して以下の成果が得られた。(1)虚血負荷により、数分の潜時を以って海馬CA1ニューロンで細胞内ナトリウム濃度が上昇した。(2)虚血負荷による細胞内ナトリウム濃度上昇はCA1領域に特異的なものであった。以上の結果より、短時間の虚血負荷により海馬CA1神経細胞においてイオンホメオスタシスが破綻を来たし、このことが後の遅発性神経細胞死を誘発する要因となることが示唆された。

在这项研究中，我们捕获了在单个神经元水平的体外脑缺血模型中在海马切片中承受缺血性负荷时，在海马CA1神经元中发生的细胞内钙和钠浓度的上升。 1。关于测量细胞内钙浓度的结果。作为单个神经元内测量的基本研究，使用常规方法进行了以下方法。（1）我们已经揭示了通过使用组织染色和使用CA1神经元缺陷型标本的宏观成像来增加CA1区域的CA升高。（2）具有不同亲和力的多个钙指标阐明了CA1神经元树突中的特定升高。基于这些结果，将CA指标注入单个海马神经元，并测量缺血期间发生的细胞内钙浓度的波动。结果，以下清楚了：（3）缺血负荷增加了海马CA1神经元的细胞内钙浓度，潜伏期为几分钟。（4）它不仅在细胞体中而且在树突中升高。 2。在细胞内钠浓度的变化方面获得了以下结果。（1）缺血负荷增加了海马CA1神经元中的细胞内钠浓度，潜伏期为几分钟。（2）由于缺血负担引起的细胞内钠浓度的增加是特定于CA1区域的。这些结果表明，短时间的缺血性负荷导致离子稳态在海马CA1神经元中分解，这可能导致后来延迟的神经元死亡。