細胞接着に関与するフコース転移酵素の生理的及び病理的意義

岩藻糖基转移酶参与细胞粘附的生理和病理意义

基本信息

批准号：
08780553
负责人：
川野武弘
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.癌細胞におけるフコース転移酵素(Fuc T)の抑制シアリル・ルイスXの生合成に関与する酵素としてFuc T III、IV、V、VI及びVIIの5種類が知られている。これらのcDNAの共通配列に対するアンチセンス・オリゴヌクレオチドや、それぞれに特異的なアンチセンス・オリゴヌクレオチドを作製し、各種の培養細胞に加え、抗シアリル・ルイスX抗体を用いたフローサイトメトリーによって解析したところ、シアリル・ルイスXの発現には有為な抑制は見られなかった。アンチセンスの添加条件等についてさらに検討中である。一方、Fuc T IIIを発現している癌細胞にポリシアル酸転移酵素(PST)cDNAを導入し安定変異株を得た。糖鎖構造解析により、この変異株では、シアリル・ルイスXき発現量が抑制されていることが明らかになった。その抑制機序については明らかではないが、ルイスX構造の先にポリシアル酸が形成された構造も存在していたことから、単純な基質の奪い合いによる結果とは言えない。今後はFuc T IIIとPSTのどちらが先にポリラクトサミンに作用するのかを明らかにする必要がある。2.細胞接着への影響E-セレクチンをコートしたディッシュに対する上記PST導入安定変異株の接着能を検討したところ、親株に比べて、有意に接着能が減少していた。この結果が、シアリル・ルイスXの発現量の抑制そのものによるのか、ポリシアル酸の発現による二次的効果であるのかについて、現在検討中である。

1。五种类型的FUC T III，IV，VI和VII被称为参与重点转移酶（FUC T）癌细胞中的生物基Lewis X的酶。这些cDNA公共阵列的抗浓度寡核苷酸，每个特定的抗固体寡核苷酸，并使用抗甲基菌，Lewis X抗体通过浮动细胞仪进行分析。 X.我们正在进一步研究反义的其他条件。另一方面，对表达FUC TIII的癌细胞引入了政策酸元（PST）cDNA（PST）cDNA，并获得了稳定的突变体。糖链结构分析表明，该突变体的突变被抑制在cialil Lewis X中。尽管尚不清楚抑制机制，但在刘易斯X结构末端形成了政策酸的结构，这不是简单的底物的结果。将来，有必要阐明哪些FUC TIII或PST首先作用于polyclactosamine。 2。对细胞粘附E-选择蛋白的涂层PST引入PST引入稳定的突变体键合能力的影响大大降低了，与母体股票相比。我们目前正在研究结果是由于抑制了cialil Lewis X的表达还是政策酸表达的次要作用。