動脈硬化進展におけるチロシンキナーゼの役割

酪氨酸激酶在动脉粥样硬化进展中的作用

• 批准号: 08770492
• 负责人: 清水 寛正
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770492/
• 关键词: 血管平滑筋細胞; チロシンキナーゼ; 遊走能; マトリックス メタロプロテイナーゼ; 動脈硬化

1)ラット大動脈由来培養血管平滑筋細胞(SMC)に、PDGF(1-10ng/ml)を添加すると、SMCの増殖は濃度依存性に亢進した(^3H-thymidine uptake)。またSMCの遊走能も濃度依存性に増加した(collagen type IVによるcoating下でのBoyden chamber法)。また培養上清へのMMP産生能も濃度依存性に増加した(gelatin zymography)。またPDGFの添加は、SMCの42、44、160kD蛋白の蛋白チロシンリン酸化反応(PTP)を引き起こした(抗リン酸化チロシン単クローン抗体によるウエスタンブロット分析)。2)phosphotyrosine phosphatase inhibitorであるvanadate(1-10μM)の添加によってもSMCの増殖能、遊走能、MMP産生量は濃度依存性に増加した。さらにPDGFとvanadateの同時添加は、おのおの単独投与に比較し、相乗的に細胞増殖、遊走、MMP産生を増加させた。またvanadateはPDGFによるSMCのPTPを促進した。3)これらの単独及び同時添加による細胞増殖作用、遊走能、MMP産生、PTPはいずれも、tyrosine kinase inhibitorであるgenistein添加により濃度依存的に抑制された。4)またMMP阻害剤であるtissue inhibitor of metalloproteinase(1,10-phenanthroline)はSMCのMMP産生を低下させるだけでなく、SMC増殖を抑制し、遊走能も抑制した。これらの結果から、チロシンリン酸化反応は、動脈硬化の進展に大きく関わっている平滑筋細胞の増殖亢進、遊走能亢進に密接に関与しており、またこの平滑筋細胞の増殖亢進、遊走能亢進の機序には、チロシンキナーゼによるMMP産生の促進が大きく関与していることが示された。

1）当添加PDGF（1-10 ng/ml）时，大鼠主动脉培养衍生来自主动脉血管平滑肌细胞（SMC），SMC的生长已增强到浓度依赖性（^3H-胸腺胞膜摄取）。 SMC的游戏能力也提高到浓度依赖性（胶原蛋白IV涂层下的Boyden Chamber方法）。培养上清液的MMP生产能力也已增加到浓度依赖性（明胶Zymbolaphy）。 PDGF的添加引起了SMC的42、44和160KD蛋白蛋白氧化酪氨酸反应（PTP）（抗磷脂氧化物氧化物单crone抗体）。 2）添加钒酸盐（1-10μM）是一种磷酸酪氨酸磷酸酶抑制剂，也增加了SMC，娱乐能力和MMP产生的生长到浓度。此外，与您自己的独立管理相比，PDGF和钒酸盐同时增加了细胞的生长，游戏和MMP生产。钒酸盐还促进了PDGF SMC PTP。 3）细胞增殖效应，娱乐能力，MMP产生和PTP，所有这些都与它们单独独立并同时添加，均被酪氨酸激酶抑制剂添加而降低。 4）金属蛋白酶（1,10-苯磺氨酸）的组织抑制剂，它是一种MMP抑制剂，不仅可以降低SMC MMP的产生，而且还抑制了SMC的生长并抑制了嬉戏的能力。基于这些结果，酪氨酸 - 中氧化反应与平滑肌细胞的生长密切相关，这极大地涉及动脉粥样硬化的进步，增强娱乐能力以及这种平滑肌细胞和平滑肌细胞和这种平滑肌细胞的生长增强娱乐能力。