末梢リンパ節へのTリンパ球特異的ホ-ミングを誘導する分子の同定

诱导 T 淋巴细胞特异性归巢至外周淋巴结的分子的鉴定

• 批准号: 08770344
• 负责人: 中野 英樹
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770344/
• 关键词: plt; ホ-ミング; T細胞; リンパ節; 血管内皮細胞; マッピング; マイクロサテライト; 第4染色体; plt; ホ-ミング; T細胞; リンパ節; 血管内皮細胞; マッピング; マイクロサテライト; 第4染色体

骨髄キメラマウスを用いた実験からpltマウスにおける異常は、リンパ球ではなくリンパ節間質に生じたものであることが明らかになった。また、リンパ節細静脈血管内皮細胞上のホ-ミング機能分子PNAdの発現及び機能は正常であった。さらに本研究ではplt遺伝子を同定するための1つの手段として、マイクロサテライトと呼ばれるゲノムDNA上に存在する単純塩基配列反復構造の多型性を用いた染色体マッピングを行った。DDD/1(Mus musculus.domesticus)の交配相手としては、遺伝的差異の大きい亜種MSM/Ms(Mus musculus.molossinus)を用いた。表現型の判定は末梢リンパ節のflow cytometry及び脾臓の免疫組織化学によって行った。F1は50匹すべてが野生型(正常)、戻し交配(BC)では300匹中野生型対変異型が156対144、さらにF2では100匹中72対28であった。また、表現型に雌雄差は見られなかった。これらの結果から、plt遺伝子が常染色体上の単一劣性遺伝子であることが確認された。各染色体上のマイクロサテライト遺伝子座をPCR反応で増幅し、plt遺伝子との組み換え率を検討したところ、plt遺伝子は第4染色体上に存在することが明らかになった。さらに、190匹のBCマウスを用いて、第4染色体上のマイクロサテライト遺伝子座との組み換え率を検討した結果、plt遺伝子は第4染色体のセントロメアから約24.7cMの位置にマップされ、マイクロサテライトD4Mit237と分離できない極めて近傍に位置することが判明した。この遺伝子座付近にはT細胞の特異的ホ-ミングに関与する可能性のある遺伝子はマップされていなかった。以上の結果から、plt遺伝子はリンパ節間質あるいは血管内皮細胞に発現する未知の遺伝子である可能性が強く示唆された。

使用骨髓嵌合小鼠的实验表明，PLT小鼠的异常发生在淋巴结间质淋巴结中，而不是淋巴细胞中。此外，在淋巴结静脉血管内皮细胞上，归巢功能分子PNAD的表达和功能是正常的。此外，在这项研究中，作为识别PLT基因的一种手段，使用在称为微映体基因组DNA上存在的简单核苷酸序列重复结构的多态性进行了染色体映射。作为DDD/1（mus musculus.domestus）的交配伙伴，使用了遗传差异很大的亚种MSM/MSM/MS（mus musculus.molossinus）。表型测定是通过脾周围淋巴结和免疫组织化学的流式细胞仪进行的。 F1中的所有50只动物均为野生型（正常），300只动物具有156至144种中型中型与突变形式，而F2中有72至28分为100分。此外，观察到表型的差异。这些结果证实了PLT基因是常染色体上的单个隐性基因。 Microsatellite loci on each chromosome were amplified by PCR reactions and the recombination rate with the Plt gene was examined, and it was revealed that the Plt gene was present on chromosome 4. Furthermore, 190 BC mice were used to investigate the recombination rate with the microsatellite locus on chromosome 4, and found that the plt gene was mapped to a position approximately 24.7 cM from the在4号染色体上的Centromere，非常靠近无法分离的微卫星D4MIT237。在该基因座附近，没有可能参与特定T细胞的特定归巢的基因。以上结果强烈表明，PLT基因可能是在淋巴结或血管内皮细胞中表达的未知基因。