細胞質不和合性を起こすリケッチア様因子のハマダラカへの導入

将引起细胞质不相容的立克次体样因子引入按蚊

• 批准号: 08770179
• 负责人: 大塚 靖
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770179/
• 关键词: Wolbachia; 細胞質不和合性; ハマダラカ; ヒトスジシマカ; マイクロインジェクション

これまでにハマダラカ属には細胞質不和合性を起こすWolbachiaの感染は報告されていなかった。今回各地各種のハマダラカの感染をWolbachiaに特異的なプライマーを調整し調べて見たがやはり感染はみられかった。Wolbachiaのハマダラカへの導入する前にコントロール実験として、すでにWolbachiaの感染が報告されているキイロショウジョウバエ(Drosophila melanogaster)とヒトスジシマカ(Aedes albopictus)に対してWolbachiaの導入を試みた。ヒトスジシマカはこれまでに調べられたすべての系統にWolbachiaが感染してることが知られているので、まずWolbachiaを持たない系統を、幼虫期にテトラサイクリン処理することによって確立した。これらのWolbachiaを持たない系統にAedes albopictusから抽出したWolbachiaの導入を試みた。キイロショウジョウバエではすでにマイクロインジェクションの方法が確立しており、Wolbachiaの導入は成功した。しかしヒトスジシマカでは卵の殻は硬く、キイロショウジョウバエと同様な方法では殻をなかなか通らず、注入に成功した卵は0.6-3.0%しか幼虫に孵化せず、その個体にはにはWolbachiaは導入されていなかった。同様にシナハマダラカ(Anopheles sinensis)にも試みたが、注入を行った卵の孵化率は0.2-0.6%でヒトスジシマカと同様にWolbachiaは導入されていなかった。これらの結果より,これまで行ったショウジョウバエで行われていたマイクロインジェクションの方法では蚊の卵にWolbachiaを導入することは困難であり、インジェクションの方法にさらなる改良が必要である。

迄今为止，尚无沃尔巴克氏体感染导致按蚊属细胞质不相容的报道。这次，我们利用沃尔巴克氏体特异性引物调查了各地各种按蚊的感染情况，但没有观察到感染情况。在将沃尔巴克氏体引入按蚊之前，我们尝试将沃尔巴克氏体引入黑腹果蝇和白纹伊蚊，这两种蚊子均已被报道感染沃尔巴克氏体。由于迄今为止检查的所有白纹伊蚊菌株都已知感染沃尔巴克氏体，因此我们首先通过在幼虫阶段用四环素处理它们来建立不含沃尔巴克氏体的菌株。我们试图将从白纹伊蚊中提取的沃尔巴克氏体引入这些无沃尔巴克氏体的品系中。黑腹果蝇的显微注射方法已经建立，并成功引入了沃尔巴克氏体。但白纹伊蚊的卵壳坚硬，采用与黑腹果蝇相同的方法很难穿过壳，成功注射的卵只有0.6-3.0%孵化成幼虫，而沃尔巴克氏体尚未引入这些人没有。对中华按蚊也进行了类似的尝试，但注射卵的孵化率为0.2-0.6%，并且与白纹伊蚊一样，没有引入沃尔巴克氏体。这些结果表明，使用迄今为止在果蝇中使用的显微注射方法很难将沃尔巴克氏体引入蚊卵中，需要对注射方法进行进一步改进。