新規抗インフルエンザウイルス薬の開発基盤となる特異的モノクローナル抗体の作製

生产特异性单克隆抗体，作为开发新型抗流感病毒药物的基础

基本信息

批准号：
23930019
负责人：
成相裕子
金额：
$ 0.38万
依托单位：
Shimane University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23930019/
关键词：
インフルエンザウイルス抗体

项目摘要

近年、H5N1型の高病原性トリインフルエンザやA型H1N1のブタとトリとの交配による高変異型などの出現が予想され、新型インフルエンザの世界的大流行が懸念されている。インフルエンザウイルスは、宿主細胞のタンパク質をハイジャックしながら、ウイルス由来のRNAポリメラーゼ複合体(PA,PB1,PB2)によりウイルスのgenomic RNAをRNAへと複製および転写する。ウイルスのgenomic RNAの複製および転写を抑制できれば、細胞内でのインフルエンザウイルスの増殖を抑えることができる。今回の奨励研究において、インフルエンザの撲滅に向けた創薬基盤を目指し、PA/PB1タンパク質(A/H1N1由来)およびPB1/PB2タンパク質を抗原としたマウスモノクローナル抗体の作製をおこない、多数のモノクローナル抗体を取得した。蛍光標識した各々の精製モノクローナル抗体を細胞内に導入後インフルエンザウイルス(A/H3N2)を感染させ、ウイルスの挙動をタイムラプス顕微鏡下に観察した。インフルエンザ感染後のPAタンパク質が細胞質から核内へ移動、その後核内から細胞質へ再移動するという時空間的挙動を観察できるマウスモノクローナル抗体PA11.9を取得した。今後、インフルエンザウイルス増殖におけるPA11.9モノクローナル抗体の詳細な解析をおこなうことにより、インフルエンザに対する創薬基盤の構築に大きく貢献するものと考える。

近年来，因猪与禽杂交而出现的H5N1高致病性禽流感和高度突变的A型H1N1禽流感引起了人们对新型流感全球大流行的担忧。流感病毒使用病毒源性RNA聚合酶复合物（PA、PB1、PB2）复制病毒基因组RNA并将其转录为RNA，同时劫持宿主细胞蛋白。如果可以抑制病毒基因组RNA的复制和转录，就可以抑制流感病毒在细胞内的增殖。在这项推进的研究中，我们将使用PA/PB1蛋白（源自A/H1N1）和PB1/PB2蛋白作为抗原来创建小鼠单克隆抗体，旨在创建一个根除流感的药物发现平台。将每种荧光标记的纯化单克隆抗体引入细胞后，用流感病毒（A/H3N2）感染细胞，并在延时显微镜下观察病毒的行为。我们获得了小鼠单克隆抗体 PA11.9，它使我们能够观察 PA 蛋白的时空行为，该蛋白在流感感染后从细胞质移动到细胞核，然后从细胞核移回细胞质。我们相信，对流感病毒增殖过程中PA11.9单克隆抗体的详细分析将极大地有助于流感药物发现平台的建立。