シングルセルレパトア解析を使用した新しいワクチン評価法の模索

利用单细胞谱分析探索新的疫苗评估方法

• 批准号: 22K15483
• 负责人: 関屋 俊輝
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15483/
• 关键词: 不活化インフルエンザ全粒子ワクチン; シングルセル; ワクチン特異的B細胞; ワクチン特異的抗体; 不活化ウイルス全粒子ワクチン; インフルエンザ

コロナウイルスによるパンデミックにより季節性インフルエンザの感染率は下がっていたが、最近になりまた上昇してきている。季節性インフルエンザワクチン摂取率もパンダミック下であるここ数年は下がっており、流行するインフルエンザウイルスと季節性インフルエンザワクチン製造ウイルス株の予想が外れた場合、感染率並びに重症度が上がる懸念がある。安定したワクチン効果を得るためには、抗原性の異なるウイルスに対しても効果が期待される「ブロードな免疫」を誘導するワクチンが望まし い。そのためにはワクチン接種により多様な特異的B細胞及びT細胞が刺激され、活性化することが重要である。しかしながら、現行の評価法で は免疫細胞の活性化を正しく評価することができない。 本研究では、抗原特異的免疫細胞のレパトア解析を行うことで、ワクチンが「ブロードな免疫」を誘導するか否かを評価し、不活化ウイルス全 粒子ワクチンと現行のスプリットワクチンにより誘導される、抗体分泌B細胞及びB細胞活性化に必須のヘルパーT細胞の抗原特異的反応の違い をシングルセルレパトア解析を使用し明らかにすることを目的とする。科研費初年度である今期はこのシングルセルレパトア解析系の確立をワクチンまたはインフルエンザウイルスを接種または感染させたマウスの末梢血単核球及び脾臓から抗原 特異的B細胞を懸垂液滴アレイ式磁気ビーズ反応(MAGrahd)法を用いて、個々の細胞からそれぞれRNAを抽出し、インフルエンザウイルス特異的抗体の重鎖と軽鎖の遺伝子の塩基配列を解析した。

季节性流感感染率由于大流行而下降，但最近升高。季节性流感疫苗的摄入量低于狂欢节，人们担心，如果有希望的流感病毒和季节性流感疫苗制造病毒近年来，感染率和严重程度将会增加。为了获得稳定的疫苗作用，需要指导“广泛免疫”的疫苗，预计对具有不同抗原的病毒有效。为此，重要的是通过疫苗接种刺激和激活各种特定的B细胞和T细胞。但是，当前的评估方法无法正确评估免疫细胞的激活。 在这项研究中，通过对抗原特异性免疫细胞进行回流分析，评估疫苗是否诱导“广泛的免疫”，并被灭活的病毒全部颗粒疫苗和当前的分裂疫苗诱导。使用单细胞麻醉剂分析，抗体分泌B细胞的抗原特异性反应和B细胞激活的差异。在这个术语中，Kenken支出的第一年，该单个细胞麻醉剂分析系统是在疫苗接种或感染的流感病毒外周血液核球和抗原特异性B细胞中使用MAGRAHD方法中的。分析了流感病毒特异性抗体和轻链基因的基础序列的细胞和基础序列。