細胞質CES活性の差異によるミコフェノール酸モフェチルのグルクロン酸抱合への影響

细胞质CES活性差异对吗替麦考酚酯葡萄糖醛酸化的影响

基本信息

批准号：
23926011
负责人：
藤山信弘
金额：
$ 0.51万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ミコフェノール酸のエステル型プロドラッグであるミコフェノール酸モフェチル(MMF)は、ヒトCES(主にCES1)によって活性型に変換され、UDP-グルクロン酸転移酵素(UGT)により抱合された後、体外排泄される。本研究ではUGTによる抱合反応にCESが与える影響を明らかにすることを目的として検討した。はじめにCES監遺伝子多型によるMPAのグルクロン酸抱合体(MPAG)体内動態の個人差に対する影響を、秋田大学医学部附属病院にて施行された腎移植患者72名を評価した。その結果、CES1A1 wild type群に比べてCES1A1 variantを有する群においてMPAGの血中トラフ濃度は、有意に高値を示した(50.9±29.2vs,78.7±58.2)。この結果はCES1A1遺伝子の変異による発現変動が、それに引き続くUGTによる抱合反応に影響を与えていることを示唆する。CES1A1 variantはフランキング領域からエクソン1に群発する遺伝子多型ユニットで、CESIタンパクのN末端領域のアミノ酸配列に影響する可能性がある。この配列の変異によりCES1の発現局在が小胞体から細胞質に変化すると仮定して更に検討を行った。まずヒト肝ミクロソーム(HLM)を用いてMMF⇒MPA⇒MPAGとMPA⇒MPAGへの代謝反応を比較した。HLMにおけるMPAGへの代謝は、MMF添加群ではVmax(nmol/min/mg protein)及びKm(μM)がそれぞれ16.8及び353、MPA添加群ではそれぞれ155及び383であり、両者に差は見られなかった。これらの結果は、MMF⇒MPAの変換がMPA⇒MPAGに比べて100倍程度早い反応速度で進むため、後者が律速となって抱合された結果と考えられる。今後は、HLM-CESと細胞質-CESの機能を区別してMPAGへの代謝を比較するために、ヒト肝遊離細胞系による検討または新たな代謝実験系の構築とその検討が必要と考えられる。

霉酚酸酯（MMF），一种酯型霉酚酸前药，被人CES（主要是CES1）转化为活性形式，并与UDP-gulucuronate转移酶（UGT）共轭，然后在体外排出。研究这项研究的目的是阐明CE对与UGT结合反应的影响。首先，我们评估了CES监督基因多态性对MPA葡萄糖醛酸酯结合物（MPAG）在Akita大学医院学院MPA中MPA的体内动力学（MPAG）体内动力学的个体差异的影响。结果，与CES1A1野生型组相比，CES1A1变体的组的血液槽浓度明显更高（50.9±29.2Vs，78.7±58.2）。该结果表明，CES1A1基因中的突变会影响UGT随后的共轭反应。 CES1A1变体是一个遗传多态性单位，从侧翼区域簇为外显子1，可能会影响CESI蛋白N末端区域的氨基酸序列。假设该序列中的突变会将CES1的表达定位从内质网状变为细胞质，则进行了进一步的研究。首先，使用人肝微粒体（HLM）比较了对MMF课的代谢反应MPA⇒MPA和MPA⇒MPAG。在MMF组中，HLM中MPAG的代谢分别为16.8和353，在MPA组中分别为155和383，两者之间没有差异。这些结果被认为是MMF转化为MPA的结果，其反应速率比MPA快到MPAG的速度快于100倍，因此后者是速率限制的共轭。将来，人们认为有必要使用无肝细胞系进行研究，或者构建新的代谢实验系统，并通过区分HLM-CES和细胞质CES的功能来将代谢与MPAG进行比较。