ミコフェノール酸薬効バイオマーカーとしてのＩＭＰＤＨ活性と薬物動態の個人差の影響

IMPDH 活性和药代动力学个体差异对霉酚酸药效生物标志物的影响

• 批准号: 26927008
• 负责人: 藤山 信弘
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26927008/
• 关键词: 腎移植; 抗HLA抗体; IMPDH活性

【背景・目的】ミコフェノール酸モフェチル(MMF)は、T&Bリンパ球などにおいてde novo経路律速酵素イノシン5'-モノホスフェート脱水素酵素(IMPDH)を選択的かつ可逆的に阻害することで、臓器移植後の拒絶抑制に大きな役割を果たしている。本研究では、生体腎移植患者における免疫抑制状態を表す血中抗HLA抗体発現に与える末梢血単核球(PBMC)IMPDH活性の影響を評価した。【方法】リンパ球感受性試験は、患者PBMCにコンカナバリンAまたはフィトヘマグルチニンを暴露させ、その細胞増殖に与えるMMF、MPA及びMPAGの影響をMTTアッセイにより評価した。またIMPDH活性は、PBMCライセートにIMP及び補酵素NAD^+を加え反応させ、産生されるキサントシン-5'-モノホスフェートをHPLCで分析した。【結果】血漿用採血からPBMCを分取し、MMF、MPA及びMPAGのリンパ球感受性試験を行った。その結果、抗原刺激によるリンパ球増殖はMMF及びMPA添加によって抑制されたが、MPAG添加による増殖抑制効果は見られなかった。また、患者26名からPBMCを分取しIMPDH活性を測定したところ、4.58±1.85 nmol/h/mg proteinであり、IMPDH活性には最大2.4倍の個人差がみられた。さらに、血中抗HLA抗体発現に対する影響を強化するためにIMPDH活性、レシピエント性別・年齢、透析期間、ABO適合/不適合、リツキシマブの使用、免疫学的リスクドナーの有無、2次移植、ドナー性別・年齢、HLAミスマッチ数、移植前リンパ球クロスマッチ試験、タクロリムス外来TDM平均値及びそのCV値を独立変数とした多変量解析を行った。その結果、2次移植であることとタクロリムス外来TDMCV値の高い患者群で移植抗HLA抗体発現が高い傾向がみられたが、IMPDH活性との関連は見られなかった。【考察】現時点ではIMPDH活性の測定症例数が少なく、抗HLA抗体発現との関連は見られなかったが、更なる追加検討が必要である。

背景和目的：霉酚酸酯（MMF）通过在T＆B淋巴细胞和其他媒体中选择性和可逆地抑制5'-单磷酸二氢酶（IMPDH）5'-单磷酸脱氢酶（IMPDH）的从头途径速率限制酶肌苷5'-单磷酸脱氢酶（IMPDH），在器官移植后抑制排斥作用中起着重要作用。这项研究评估了外周血单核细胞（PBMC）IMPDH活性对血液抗HLA抗体表达的影响，该抗体表达代表了活着的肾移植患者中的免疫抑制状态。方法：通过MTT分析评估淋巴细胞易感性测试，通过将con菜蛋白蛋白蛋白酶或植物链甲夹蛋白暴露于患者PBMC中对MMF，MPA和MPAG对细胞增殖的影响。此外，对于IMPDH活性，PBMC裂解物与IMP和辅酶NAD^+反应，并通过HPLC分析了产生的Xanthosine-5'-单磷酸盐。 [结果]从等离子体血液样本中分离PBMC，并对MMF，MPA和MPAG进行了淋巴细胞易感性测试。结果，通过添加MMF和MPA抑制了由抗原刺激引起的淋巴细胞增殖，但没有观察到抑制MPAG生长的影响。此外，当PBMC与26例患者分离并测量IMPDH活性时，结果为4.58±1.85 nmol/h/mg蛋白，IMPDH活性的最大个性差异为2.4倍。 Furthermore, multivariate analysis was performed using IMPDH activity, recipient sex/age, dialysis period, ABO match/incompatibility, rituximab use, presence or absence of immunological risk donors, secondary implantation, donor sex/age, number of HLA mismatches, pre-transplant lymphocyte cross-match test, and tacrolimus outliving TDM mean and its CV values ​​as independent变量。结果，在患有高门能克莫司TDMCV值的患者组中表达移植抗HLA抗体的趋势，但没有发现与IMPDH活性的关联。 [讨论]当前，在很少有情况下测量IMPDH活性，并且没有发现与抗HLA抗体表达的关联，但是需要进一步研究。