新規イノシトール1、4、5-ミリン酸結合蛋白質の機能解明に関する研究
新型肌醇1,4,5-肉豆蔻酸酯结合蛋白的功能阐明研究
基本信息
- 批准号:12780477
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 2001
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究で扱うp130はイノシトール1,4,5-三リン酸[Ins(1,4,5)P_3]結合性蛋白質として申請者らがラット脳より見い出した新しい分子である。この分子はホスホリパーゼC(PLC)と高い相同性を有しながらPLC酵素活性を発揮し得ないものだが、申請者らはp130と最も相同性の高いPLCアイソザイムであるPLC-δ1との種々のキメラ分子を作製し活性消失の分子機構解明を試みた(Kanematsu et al.)。p130はそのアイソタイプを含めて線虫から種々のほ乳動物まで保存性を保ちながら広く分布していることから、「酵素活性を持たないPLC様蛋白質ファミリー(PLC-Related catalytically Inactive Protein)」として、PRIPファミリーという名前を提案した。またPRIPの過剰発現細胞を用いた実験からそのIns(1,4,5)P_3結合能によって細胞内カルシウムシグナリングの修飾蛋白質として機能し得ることを実験的に示した(Takeuchi et al.)。酵母two-hybrid法により同定したPRIP結合蛋白質、蛋白質脱リン酸化酵素(protein phosphatase-1,PP1)とGABA_A受容体に結合する蛋白質GABARAP(GABA Receptor Associated Protein)との試験管内での結合を確認し、現在これら分子間の機能的な相互作用について解析中である。PP1に関してはマウス脳からの免疫沈降によっても結合が確認され、またPRIPが濃度依存的にPP1の酵素活性を抑制的に調節していることを明らかにした(投稿中)。さらに、p130がさまざまなリン酸化酵素によってリン酸化され、その結果生じる各分子間の相互作用の変化について検討中である。
这项研究中处理的P130是申请人从大鼠脑中发现的一种新分子,作为1,4,5-3磷酸的结合蛋白[INS(1,4,5)P_3]。该分子与磷脂酶C(PLC)具有高的同源性,但无法证明PLC酶活性,但申请人与PLC同工酶具有多种嵌合体,这是最同源的PLC-Δ1。活动的活性(Kanematsu等人)。由于p130被广泛分布在昆虫到各种伙伴,包括同种型,因为“与PLC相关的催化性蛋白质”,该蛋白质没有酶活性,因此PRIP提出了家族的名称。实验表明,使用PRIP的过度细胞的实验可以通过INS(1,4,5)P_3(Takeuchi等人)作为细胞内钙信号蛋白。 PRIP结合蛋白,蛋白去除酶(蛋白质磷酸酶-1,PP1)和GABA_A受体Gabarap检查试管中的键)我们目前正在分析这些分子之间的功能相互作用。至于PP1,也通过小鼠脑的免疫沉积物证实了结合,并且发现PRIP在PP1的酶活性的令人印象深刻的调整(在发布中)中受到抑制。此外,p130被认为改变了每个分子之间的相互作用,每种分子被各种磷酸化酶磷酸化,从而导致各种磷酸化酶。
项目成果
期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hermosura,M.C. et al: "InsP4 facilitates store-operated calcium influx by inhibition of InsP3 5-phosphatase."Nature. 408. 735-740 (2000)
赫莫苏拉,M.C.
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Takeuchi,H. et al.: "Inhibition of Ca2+ signalling by p130, a phospholipase-C-related catalytically inactive protein : critical role of the p130 pleckstrin homology domain."Biochemical Journal. 349. 357-368 (2000)
竹内,H.
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Kanematsu,T. et al.: "Domain organization of p130, PLC-related catalytically inactive protein, and structural basis for the lack of enzyme activity."European Journal of Biochemistry. 267. 2731-2737 (2000)
兼松,T.
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
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- 作者:
- 通讯作者:
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