マンナン結合タンパク質依存性細胞性細胞障害反応(MDCC)の機構解明

甘露聚糖结合蛋白依赖性细胞毒性反应（MDCC）的机制阐明

• 批准号: 12780471
• 负责人: 上村 和秀
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780471/
• 关键词: マンナン結合タンパク質(MBP); MBP依存性細胞性細胞障害作用; 抗腫瘍作用

血清マンナン結合タンパク質(MBP)はマンノース、N-アセチルグルコサミンに特異的な動物レクチンであり、異物表面の糖鎖と結合して補体活性化能を示すなど、異物認識分子として先天性免疫において重要な役割を果たす。研究代表者らはMBPが担癌マウスにおいて補体非依存的とみられる抗腫瘍作用を示すことを見いだし、この機構として補体非依存的細胞性細胞障害作用(MDCC)を提唱した。本研究課題においてはまず、MDCCがin vitroにおいて再現されることを見いだした。すなわち、ヒト結腸癌由来細胞株SW1116を標的細胞に、単球系細胞THP-1をエフェクター細胞として用い細胞障害試験を行ったところ、顕著なMBP依存的細胞障害が認められた。この実験でエフェクター細胞が産生する細胞障害因子は可溶性かつ易熱性を有することが明らかとなり、何らかのタンパク質の関与が示唆された。なお、細胞障害を誘導するタンパク質としてよく知られる腫瘍壊死因子(TNF-α)ついては本機構には関与しないことがわかった。また、合成糖鎖リガンドを用いてMBPによる補体非依存的な白血球活性化作用を調べ、固定化リガンドに結合したMBPにより好中球の凝集および活性酸素の放出が誘導されることを見いだした。MBPのコラーゲン用領域フラグメントを固相化した場合も同様の活性化が認められたことから、MBPによる好中球刺激作用にはMBPのコラーゲン様領域が重要であることが示唆された。また、この活性化機構には血小板活性化因子(PAF)が関与することがアンタゴニストを用いた実験より明らかとなった。さらに、本研究においては、担癌マウスにMBPを投与した後の腫瘍組織内にマクロファージおよび好中球が浸潤することを見いだしており、MDCCにはミエロイド系細胞が重要な役割を果たすことが強く示唆された。

血清Mannan结合蛋白（MBP）是一种针对甘露糖和N-乙酰葡萄糖特异的动物凝集素，并且在先天免疫中作为异物识别分子起着重要作用，例如结合异物表面上的聚糖并表现出补体活化能力。研究人员发现，MBP表现出抗肿瘤作用，这些作用被认为在肿瘤的小鼠中与补体无关，并提出了与补体无关的细胞细胞毒性（MDCC）作为这种机制。在该研究主题中，我们首先发现MDCC在体外得到了复制。换句话说，当使用人类结肠癌衍生的细胞系SW1116作为靶细胞和单核细胞THP-1作为效应细胞进行细胞损伤测试时，观察到显着的MBP依赖性细胞损伤。该实验表明，效应细胞产生的细胞毒性因子可溶和耐热，表明某些蛋白质的参与。已经发现，肿瘤坏死因子（TNF-α）众所周知，该因子是一种诱导细胞损伤的蛋白质，与这种机制无关。此外，使用合成的聚糖配体研究MBP的补体非依赖性白细胞激活效应，并发现与固定配体结合的MBP诱导中性粒细胞聚集并释放活性氧。当固定MBP的胶原蛋白区域片段时，观察到类似的激活，这表明MBP的胶原样区域对于MBP的中性粒细胞刺激效应很重要。此外，使用拮抗剂的实验表明，该激活机制涉及血小板激活因子（PAF）。此外，在这项研究中，我们发现巨噬细胞和嗜中性粒细胞在将MBP施加到肿瘤小鼠的情况下会入侵肿瘤组织，并强烈建议髓样细胞在MDCC中起重要作用。