新しい細胞接着因子Ninjurinファミリーに関する細胞生物学的研究

新型细胞粘附因子Ninjurin家族的细胞生物学研究

基本信息

批准号：
09780704
负责人：
荒木敏之
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780704/
关键词：
細胞接着膜蛋白スプライシング ninjurin

项目摘要

ninjurin-2は正常成熟個体の各臓器ではNorthen Blot法で検出可能な量のmRNAは存在せず、RT-PCR法では脳、後根神経節など神経系に他の臓器に比べてより豊富なmRNAが存在することが明らかなった。また、myc-epitopeを付加した蛋白を発現ベクターに組み込み、CHO細胞に発現させたninjurin2-myc蛋白の存在部位を抗c-myc抗体を用いて解析する方法により、ninjurin-2はninjurin-1と同様に細胞膜上に存在することが示された。しかしその一方、同じ発現ベクターを用いてninjurin-2を血球系浮遊細胞であるJurkat細胞に発現させたところ、Jurkat細胞の接着性は亢進せず、ninjurin-2はファミリーメンバーのninjurin-1とは異なり、細胞接着因子としての作用を持たない可能性が示唆された。このことは、ninjurin-2のアミノ酸の一次構造中に、我々がすでにninjurin-1において同定した接着モチーフが存在しないことと符合するものと考えられた。ESTデータベースの検索により、ninjurin-2はninjurin-1と同様にスプライシングによる発現制御を受けていることが明らかとなった。しかし、これまでの検索によると、正常成熟個体を用いたRT-PCRでは、スプライスバリアントを主として発現している臓器は認められず、今後、発生段階や悪性腫瘍などにおける転写制御の可能生を検討する必要がある。

在每个正常成熟个体的每个器官中，发现忍者-2没有通过北面印迹检测到的mRNA，RT-PCR显示，与其他器官相比，在神经系统中发现mRNA在神经系统中更丰富，例如脑和背根神经节。此外，通过使用抗C-MYC抗体分析CHO细胞中表达的忍者2-Myc蛋白的存在，将带有MYC-凝集素的蛋白掺入了表达载体中，并且在CHO细胞中表达的Ninjurin2-myc蛋白的位点与CHO细胞中表达的蛋白相同，与细胞膜上相同，与NinnInj相同。但是，当在Jurkat细胞中表达忍者-2时，使用相同表达载体的血细胞悬浮细胞时，Jurkat细胞的粘附并没有增加，这表明与家族成员Ninjurin-1不同，Ninjurin-2并未充当细胞粘附因子。人们认为这与我们在忍者-2的主要结构中已经在忍者-1中已经鉴定出的粘附基序是一致的。搜索EST数据库表明，忍者-2受剪接诱导的表达控制，类似于Ninjurin-1。但是，根据以前的搜索，使用正常成熟的个体在RT-PCR中未发现任何表达剪接变体的器官，因此有必要考虑未来的发育阶段和恶性肿瘤的转录控制。