P.gingivalis由来Mfa1線毛の歯肉上皮細胞に対する免疫調節能の検討

牙龈卟啉单胞菌来源的Mfa1菌毛对牙龈上皮细胞免疫调节能力的检测

• 批准号: 22K17069
• 负责人: 高柳 結平
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Aichi Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17069/
• 关键词: Porphyromonas gingivalis; Mfa1; ヒト歯肉上皮細胞; short fimbriae; 歯肉上皮細胞

Porphyromonas gingivalisが持つ線毛は、歯周組織への定着のみならず歯周組織破壊においても重要な役割を担っている。二種類ある線毛のうち、Mfa1線毛に関する研究、特に宿主応答に与える影響に関する報告はその重要性と比べごく僅かである。今回申請者らは、歯周組織破壊における宿主の免疫応答に対するMfa1線毛の役割を明らかにすることを目的とし、P. gingivalis線毛のヒト歯肉上皮細胞に対する免疫調節能に関する検討を行うこととした。Mfa1線毛を精製し、JI-1として実験に使用した。また、 Mfa5がermF-Bによって破壊されたMfa5変異体（FMFA5）株および遺伝子相補体(FMFA5C)株からも同様に線毛を精製し、それぞれFMFA5およびFMFA5Cとして実験に使用した。当初の予定よりヒト歯肉上皮細胞の単離・培養に少し遅れが出ているため、まずはヒト歯肉上皮癌細胞であるCa9-22に精製した各種線毛で刺激し、PCRアレイにより各種遺伝子発現変化を網羅的に解析する予定である。

牙龈毒性牙龈毒性不仅在牙周组织中而且在破坏牙周组织的纤毛中起着重要作用。在这两种类型的pili中，对MFA1 PILI的研究，尤其是它们对宿主反应的影响，与它们的重要性相比很少。目前的申请人决定研究对人牙龈上皮细胞的免疫调节能力，目的是阐明MFA1 PILU在宿主免疫反应中的作用在牙周组织破坏中。 MFA1 Pili被纯化并在实验中用作JI-1。还从MFA5突变体（FMFA5）和基因补体（FMFA5C）菌株中纯化了Pilus，其中MFA5被ERMF-B和基因补体（FMFA5C）中断并在实验中分别用作FMFA5和FMFA5C。由于人类牙龈上皮细胞的隔离和培养比最初计划的延迟略有延迟，因此我们计划首先使用从CA9-22（人类牙龈上皮癌细胞）纯化的各种pilia刺激它们，并全面地分析了使用PCR阵列对各种基因表达的变化。