新規免疫治療標的やバイオマーカー同定のための胃癌腹膜播種の動的免疫微小環境の解析

分析胃癌腹膜播散的动态免疫微环境，以确定新的免疫治疗靶点和生物标志物

• 批准号: 22K15586
• 负责人: 山下 晃平
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15586/
• 关键词: 胃癌; 腹膜播種; 腹水; 免疫微小環境; サブクローン; 癌性腹水; 腫瘍免疫

近年、免疫チェックポイント阻害剤に代表される免疫治療が臨床試験での有効な治療成績を基に臨床応用されているが、胃癌の最多の転移形式である胃癌腹膜播種への治療効果は乏しく、胃癌腹膜播種特有の腫瘍免疫微小環境の解明が望まれる。本研究は、癌性腹水を利用し胃癌腹膜播種の免疫治療抵抗性に関わる因子の同定を目指している。まず、免疫治療による胃癌腹膜播種の免疫プロファイルの経時的変化を同定するために、胃癌腹膜播種患者の免疫治療前後の癌性腹水を探索した。治療詳細を含む臨床情報から計31症例の適格症例を同定したが、その大半が免疫治療をごく短期間受けた後に死亡した症例であり、免疫治療による腹腔内の腫瘍免疫微小環境のリモデリングを十分に観察できない可能性が示唆された。そのため、同一患者の治療前後の比較ではなく、治療経過や採取時期の異なる患者の腹水検体を用いて、生物統計学的手法にて腹水がん細胞のサブクローン進化構造を解明する方針とした。このサブクローンは異なる遺伝子変異の組み合わせをもつ細胞集団でしばしば治療抵抗性と関連することが報告されており、治療効果や生存などの臨床情報と照らし合わせることで免疫治療抵抗性の解明に寄与することが期待される。現在、パイロット研究として8症例の胃癌腹膜播種患者サンプルを全エクソームシークエンス（WES）、シングルセルRNAシークエンス(scRNA seq)へ提出し、生物統計学者との共同研究で解析を進めている。観察された変異をベースとし個々の細胞を細胞亜集団に分け、サブクローン進化の系統樹構築に着手している。現在得られた情報では、腹膜播種細胞においては分岐系統でなく線形系統のサブクローン進化を推定している。また、ごく限られた数ではあるが、癌細胞と骨髄系細胞の両方の特徴を有する細胞亜集団が同定され、胃癌腹膜播種の免疫微小環境との関連について検討を行っている。

近年来，以免疫检查点抑制剂为代表的免疫疗法已根据临床试验的有效治疗结果进行了临床应用，但是治疗对胃癌腹膜传播的影响是胃癌的最不良转移性形式，这是较差的，并且值得澄清肿瘤免疫微生物剂的胃癌独特的胃癌。这项研究旨在确定使用癌性腹水在胃癌传播中涉及免疫疗法抗性的因素。首先，为了确定随着时间的推移腹膜传播胃癌的免疫特征的变化，我们在免疫疗法之前和之后搜索了腹膜胃癌患者的癌性腹水。从包括治疗细节的临床信息中确定了总共31例合格病例，但是大多数病例在很短的时间内接受免疫疗法后死亡，这表明可能无法通过免疫疗法完全观察到腹部空腔中肿瘤免疫微环境的重塑。因此，该计划不是在治疗前后对同一患者进行比较，而是使用生物统计学方法使用来自不同治疗课程的患者的腹水标本和收集时间来阐明腹水癌细胞的进化结构。据报道，该亚克隆通常与具有不同基因突变组合组合的细胞群中的治疗耐药性有关，并且可以预期，通过将其与临床信息（例如治疗效果和生存）进行比较，它将有助于阐明免疫疗法抗性。目前，作为一项试点研究，已将八例胃癌腹膜传播样品提交给整个外显子组序列（WES）和单细胞RNA序列（SCRNA SEQ），目前正在与生物统计学家合作进行分析。基于观察到的突变，单个细胞分为细胞亚群，并且正在进行用于亚克隆进化的系统发育树。该信息当前获得的线性线性线性估计值的估计值是腹膜种子细胞中线性线的进化。此外，尽管已经鉴定出非常有限的细胞，但癌细胞和髓样细胞的细胞亚群，以及与胃癌腹膜传播的免疫微环境的关联。